అల్ట్రా న్యూక్లీస్ GMP-గ్రేడ్
పిల్లి సంఖ్య: HC2016A
UltraNuclease GMP-గ్రేడ్ ఎస్చెరిచియా కోలి (E.coli)లో జన్యుపరంగా ఇంజినీరింగ్ మరియు GMP పరిసరాలలో తయారు చేయడం ద్వారా వ్యక్తీకరించబడుతుంది మరియు శుద్ధి చేయబడుతుంది.ఇది శాస్త్రీయ పరిశోధనలో సెల్ సూపర్నాటెంట్ మరియు సెల్ లైసేట్ యొక్క స్నిగ్ధతను తగ్గిస్తుంది, ప్రోటీన్ శుద్దీకరణ సామర్థ్యాన్ని పెంచుతుంది మరియు ప్రోటీన్ ఫంక్షనల్ పరిశోధనను మెరుగుపరుస్తుంది.ఉత్పత్తి హోస్ట్ న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ అవశేషాలను pg-గ్రేడ్‌కి తగ్గించగలదు, వైరస్ శుద్దీకరణ, వ్యాక్సిన్ తయారీ మరియు ప్రోటీన్/పాలిసాకరైడ్ ఔషధ తయారీతో సహా అప్లికేషన్ల యొక్క జీవ ఉత్పత్తుల పనితీరు మరియు భద్రతను మెరుగుపరుస్తుంది.అంతేకాకుండా, సెల్ థెరపీ మరియు వ్యాక్సిన్ డెవలప్‌మెంట్‌లో హ్యూమన్ పెరిఫెరల్ బ్లడ్ మోనోన్యూక్లియర్ సెల్స్ (పిబిఎంసి) క్లంపింగ్‌ను నిరోధించడానికి కూడా ఉత్పత్తిని అన్వయించవచ్చు.
UltraNuclease ఒక స్టెరిలైజ్డ్ రియాజెంట్ రూపంలో అందించబడుతుంది, బఫర్‌లో (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% గ్లిజరిన్), రంగులేని, పారదర్శక ద్రవ రూపాన్ని కలిగి ఉంటుంది.ఈ ఉత్పత్తి GMP ప్రక్రియ అవసరాల ద్వారా ఉత్పత్తి చేయబడుతుంది మరియు ద్రవ రూపంలో అందించబడుతుంది.
భాగాలు
UltraNuclease GMP-గ్రేడ్ (250 U/μL)
నిల్వ పరిస్థితులు
ఉత్పత్తి పొడి మంచుతో రవాణా చేయబడుతుంది మరియు రెండు సంవత్సరాల పాటు -25℃~-15°C వద్ద నిల్వ చేయబడుతుంది.
ఉత్పత్తి తెరవబడి, 4℃ వద్ద ఒక వారం కంటే ఎక్కువ కాలం నిల్వ చేయబడితే, ఫిల్టరింగ్ చేయమని మేము సిఫార్సు చేస్తున్నాముసూక్ష్మజీవుల కాలుష్యాన్ని నిరోధించే ఉత్పత్తి.
స్పెసిఫికేషన్లు
| వ్యక్తీకరణ హోస్ట్ | UltraNuclease జన్యువుతో రీకాంబినెంట్ E. కోలి |
| పరమాణు బరువు | 26.5 kDa |
| విద్యుత్ బిందువు | 6.85 |
| స్వచ్ఛత | ≥99% (SDS-PAGE) |
| నిల్వ బఫర్ | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% గ్లిజరిన్ |
|
యూనిట్ నిర్వచనం | ఒక కార్యాచరణ యూనిట్ (U) యొక్క నిర్వచనం అంటే ఎంజైమ్ మొత్తం2. 625 mLలో 30 నిమిషాలలో ΔA260 యొక్క శోషణ విలువను 1.0 మార్చండి8.0 pHతో 37℃ వద్ద ప్రతిచర్య వ్యవస్థ (పూర్తి జీర్ణక్రియకు సమానం37 μg సాల్మన్ స్పెర్మ్ DNA ఒలిగోన్యూక్లియోటైడ్‌లుగా) |
సూచనలు
1. నమూనా సేకరణ
అనుబంధ కణాలు: మాధ్యమాన్ని తీసివేయండి, PBSతో కణాలను కడగండి మరియు సూపర్‌నాటెంట్‌ను తీసివేయండి.
సస్పెన్షన్ కణాలు: సెంట్రిఫ్యూగేషన్ ద్వారా కణాలను సేకరించండి, PBSతో కణాలను కడగడం, 6,000 వద్ద సెంట్రిఫ్యూజ్10 నిమిషాలు rpm, గుళికను సేకరించండి.
ఎస్చెరిచియా కోలి: సెంట్రిఫ్యూగేషన్ ద్వారా బ్యాక్టీరియాను సేకరించి, PBSతో ఒకసారి కడగడం, 8,000 వద్ద సెంట్రిఫ్యూజ్5 నిమిషాలు rpm, మరియు గుళికను సేకరించండి.
2. నమూనా చికిత్స
సేకరించిన సెల్ గుళికలను ద్రవ్యరాశి(g) నుండి వాల్యూమ్(mL)1:(10-20) నిష్పత్తిలో లైసిస్ బఫర్‌తో లేదా మంచు మీద లేదా గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద యాంత్రిక లేదా రసాయన పద్ధతుల ద్వారా చికిత్స చేయండి (1g సెల్ గుళికలో సుమారుగా ఉంటుంది
109 కణాలు).
3. ఎంజైమ్ చికిత్స
ప్రతిచర్య వ్యవస్థకు 1-5mM MgClని జోడించి, pHని 8-9కి సర్దుబాటు చేయండి.
1 గ్రా సెల్ గుళికలను జీర్ణం చేయడానికి 250 యూనిట్ల నిష్పత్తి ప్రకారం అల్ట్రాన్యూక్లీస్‌ను జోడించండి, 37℃ వద్ద 30 నిమిషాలకు పైగా పొదిగేది.దయచేసి ఎంచుకోవడానికి "సిఫార్సు చేయబడిన ప్రతిచర్య సమయం" ఫారమ్‌ను చూడండిచికిత్స యొక్క వ్యవధి.
4. సూపర్నాటెంట్ సేకరణ
30 నిమిషాల పాటు 12,000 rpm వద్ద సెంట్రిఫ్యూజ్ చేసి, సూపర్‌నాటెంట్‌ను సేకరించండి.
గమనిక: ద్రావణం ఆమ్లంగా లేదా ఆల్కలీన్‌గా ఉంటే లేదా ఉప్పు, డిటర్జెంట్లు లేదా అధిక సాంద్రతలను కలిగి ఉంటేdenaturants, దయచేసి ఎంజైమ్ మోతాదును పెంచండి లేదా తదనుగుణంగా చికిత్స సమయాన్ని పొడిగించండి.
సిఫార్సు చేయబడిన ప్రతిచర్య స్థితిఆన్‌లు
| పరామితి | ఆప్టిమల్ కండిషన్ | ఎఫెక్టివ్ కండిషన్ |
| Mg²+ ఏకాగ్రత | 1-5 మి.మీ | 1-10 మి.మీ |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| ఉష్ణోగ్రత | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT ఏకాగ్రత | 0-100 మి.మీ | >0 మి.మీ |
| మెర్కాప్టోఇథనాల్ ఏకాగ్రత | 0-100 మి.మీ | >0 మి.మీ |
| మోనోవాలెంట్ కేషన్ ఏకాగ్రత | 0-20 మి.మీ | 0-150 మి.మీ |
| ఫాస్ఫేట్ లోన్ ఏకాగ్రత | 0-10 మి.మీ | 0-100 మి.మీ |
సిఫార్సు చేయబడింది స్పందన సమయం (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| అల్ట్రాన్యూక్లీస్ మొత్తం (చివరి ఏకాగ్రత) | ప్రతిస్పందన సమయం |
| 0.25 U/mL | >10 గం |
| 2.5 U/mL | >4గం |
| 25 U/mL | 30 నిమి |
గమనికలు:
దయచేసి మీ ఆరోగ్యం మరియు భద్రతను నిర్ధారించడానికి అవసరమైన PPE, అటువంటి ల్యాబ్ కోటు మరియు చేతి తొడుగులు ధరించండి!
