ర్నాస్ ఎ
Ribonuclease A (RNaseA) అనేది 13.7 kDa పరమాణు బరువుతో 4 డైసల్ఫైడ్ బంధాలను కలిగి ఉన్న ఒక సింగిల్ స్ట్రాండెడ్ పాలీపెప్టైడ్.RNase A అనేది ఒక ఎండోరిబోన్యూక్లీస్, ఇది ప్రత్యేకంగా C మరియు U అవశేషాల వద్ద సింగిల్ స్ట్రాండెడ్ RNAను క్షీణింపజేస్తుంది.ప్రత్యేకించి, క్లీవేజ్ ఒక న్యూక్లియోటైడ్ యొక్క 5′-రైబోస్ మరియు పక్కనే ఉన్న పిరిమిడిన్ న్యూక్లియోటైడ్ యొక్క 3′-రైబోస్‌పై ఫాస్ఫేట్ సమూహం ద్వారా ఏర్పడిన ఫాస్ఫోడీస్టర్ బంధాన్ని గుర్తిస్తుంది, తద్వారా 2, 3′-సైక్లిక్ ఫాస్ఫేట్లు హైడ్రోలైజ్డ్ 3 ఫాస్ఫేట్‌లకు అనుగుణంగా ఉంటాయి. ′న్యూక్లియోసైడ్ ఫాస్ఫేట్లు (ఉదా pG-pG-pC-pA-pG pG-pG-pCp మరియు A-PGని ఉత్పత్తి చేయడానికి RNase A ద్వారా క్లీవ్ చేయబడింది).RNase A అనేది సింగిల్ స్ట్రాండెడ్ RNAని క్లియర్ చేయడంలో అత్యంత చురుకైనది.సిఫార్సు చేయబడిన పని ఏకాగ్రత 1-100μG/mL, వివిధ ప్రతిచర్య వ్యవస్థలకు అనుకూలంగా ఉంటుంది.తక్కువ ఉప్పు సాంద్రత (0-100 mM NaCl) RNA-DNA హైబ్రిడైజేషన్ ద్వారా ఏర్పడిన సింగిల్-స్ట్రాండ్డ్ RNA, డబుల్ స్ట్రాండెడ్ RNA మరియు RNA గొలుసులను కత్తిరించడానికి ఉపయోగించవచ్చు.అయినప్పటికీ, అధిక ఉప్పు సాంద్రత వద్ద (≥0.3 M), RNase A ప్రత్యేకంగా సింగిల్ స్ట్రాండెడ్ RNAని క్లివ్ చేస్తుంది.
ప్లాస్మిడ్ DNA లేదా జన్యుసంబంధమైన DNA తయారీ సమయంలో RNAని తొలగించడానికి RNase A చాలా సాధారణంగా ఉపయోగించబడుతుంది. తయారీ ప్రక్రియలో DNase చురుకుగా ఉందా లేదా అనేది ప్రతిచర్యను సులభంగా ప్రభావితం చేస్తుంది.DNase కార్యాచరణను నిష్క్రియం చేయడానికి నీటి స్నానంలో మరిగే సంప్రదాయ పద్ధతిని ఉపయోగించవచ్చు.ఈ ఉత్పత్తిలో DNase మరియు ప్రోటీజ్ ఉండవు మరియు ఉపయోగం ముందు వేడి చికిత్స అవసరం లేదు.అదనంగా, ఈ ఉత్పత్తిని RNase రక్షణ విశ్లేషణ మరియు RNA సీక్వెన్స్ విశ్లేషణ వంటి పరమాణు జీవశాస్త్ర ప్రయోగాలలో కూడా ఉపయోగించవచ్చు.
నిల్వ పరిస్థితులు
ఉత్పత్తిని -25～-15℃ వద్ద నిల్వ చేయవచ్చు, ఇది 2 సంవత్సరాలు చెల్లుతుంది.
సూచనలు
RNase A స్టోరేజ్ సొల్యూషన్‌ను సిద్ధం చేయడానికి ఇది సాధారణ పద్ధతుల్లో ఒకటి.ద్వారా కూడా తయారు చేసుకోవచ్చుప్రయోగశాల లేదా సూచన సాహిత్యంలో సాంప్రదాయ పద్ధతుల ప్రకారం ఇతర పద్ధతులు (ఉదానేరుగా 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 లేదా Tris-NaCl ద్రావణంలో కరిగిపోతుంది)
1. RNase A నిల్వ ద్రావణాన్ని 10 mg/mL సిద్ధం చేయడానికి 10 mM సోడియం అసిటేట్ (pH 5.2) ఉపయోగించండి
2. 15 నిమిషాలు 100 ℃ వద్ద వేడి చేయడం
3. గది ఉష్ణోగ్రతకు చల్లబరుస్తుంది, 1/10 వాల్యూమ్ 1 M Tris-HCl (pH 7.4) జోడించండి, దాని pHని 7.4కి సర్దుబాటు చేయండి (కోసంఉదాహరణకు, 500 ml 10g/ml RNase నిల్వ సొల్యూషన్ 1M Tris-HCL, PH7.4) జోడించండి
4. స్తంభింపచేసిన నిల్వ కోసం -20℃ వద్ద సబ్-ప్యాకేజ్ చేయబడింది, ఇది 2 సంవత్సరాల వరకు స్థిరంగా ఉంటుంది.
[గమనికలు]: తటస్థ పరిస్థితులలో RNaseA ద్రావణాన్ని ఉడకబెట్టినప్పుడు, RNase అవపాతం ఏర్పడుతుంది;తక్కువ pH వద్ద ఉడకబెట్టండి మరియు అవపాతం ఉన్నట్లయితే, అది గమనించవచ్చు, ఇది ప్రోటీన్ మలినాలను కలిగి ఉండటం వలన సంభవించవచ్చు.ఉడకబెట్టిన తర్వాత అవక్షేపం కనుగొనబడితే, హై-స్పీడ్ సెంట్రిఫ్యూగేషన్ (13000rpm) ద్వారా మలినాలను తొలగించవచ్చు, ఆపై గడ్డకట్టే నిల్వ కోసం సబ్-ప్యాక్ చేయబడుతుంది.
ఉత్పత్తి సమాచారం
| పర్యాయపదాలు | రిబోన్యూక్లీస్ I;ప్యాంక్రియాటిక్ రిబోన్యూక్లీస్;రిబోన్యూక్లీస్ 3'-పిరిమిడ్నూలిగోన్యూక్లియోటిడోహైడ్రోలేస్;Rnase A;ఎండోరిబోన్యుల్సీస్ I |
| CAS నం. | 9001-99-4 |
| స్వరూపం | వైట్ లైయోఫైలైజ్డ్ పౌడర్ |
| పరమాణు బరువు | ~ 13.7kDa (అమినో యాసిడ్ సీక్వెన్స్) |
| Ph విలువ | 7.6 (కార్యకలాప పరిధి 6-10) |
| తగిన ఉష్ణోగ్రత | 60℃ (కార్యాచరణ పరిధి 15-70℃) |
| యాక్టివేటింగ్ ఏజెంట్ | Na2+.కె+ |
| నిరోధకం | Rnase నిరోధకం |
| నిష్క్రియం చేసే పద్ధతి | వేడి చేయడం ద్వారా నిష్క్రియం చేయబడదు, సెంట్రిఫ్యూజ్ కాలమ్‌ని ఉపయోగించమని సూచించబడింది |
| మూలం | బోవిన్ |
| ద్రావణీయత | నీటిలో కరుగుతుంది (10mg/ml) |
| పొడి మీద నష్టం | ≤5.0% |
| ఎంజైమ్ చర్య | ≥60 కునిట్జ్ యూనిట్లు/mg |
| ఐసోఎలెక్ట్రిక్ పాయింట్ | 9.6 |
గమనికలు
మీ భద్రత మరియు ఆరోగ్యం కోసం, దయచేసి ఆపరేషన్ కోసం ల్యాబ్ కోట్లు మరియు డిస్పోజబుల్ గ్లోవ్స్ ధరించండి.
