మల్టీప్లెక్స్ వన్ స్టెప్ RT-qPCR ప్రీమిక్స్
వివరణ
పిల్లి సంఖ్య: HCR5141A
మల్టీప్లెక్స్ వన్ స్టెప్ RT-qPCR ప్రీమిక్స్ అనేది టెంప్లేట్‌గా RNA ఆధారంగా మల్టీప్లెక్స్ క్వాంటిటేటివ్ PCR కిట్.ప్రయోగంలో, రివర్స్ ట్రాన్స్క్రిప్షన్ మరియు క్వాంటిటేటివ్ PCR అదే రియాక్షన్ ట్యూబ్‌లో నిర్వహించబడతాయి, ప్రయోగాత్మక ఆపరేషన్‌ను సులభతరం చేస్తుంది మరియు కాలుష్య ప్రమాదాన్ని తగ్గిస్తుంది.బఫర్ మరియు ఎంజైమ్ మిక్స్ యొక్క ప్రత్యేకమైన డిజైన్‌ను ఒక-దశ లైయోఫైలైజ్డ్ సిస్టమ్‌లో ఉపయోగించవచ్చు.పరిమాణాత్మక విస్తరణ కోసం హాట్‌స్టార్ట్ టాక్ DNA పాలిమరేస్‌ని ఉపయోగించి మొదటి స్ట్రాండ్ cDNA యొక్క సమర్థవంతమైన సంశ్లేషణ కోసం కిట్ వేడి-నిరోధక రివర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్టేజ్‌ను ఉపయోగిస్తుంది.ఇది ఆప్టిమైజ్ చేయబడిన రియాక్షన్ బఫర్, ఎంజైమ్‌ల మిక్స్ మొదలైనవి కలిగి ఉంది మరియు నిర్దిష్ట-కాని PCR యాంప్లిఫికేషన్‌ను సమర్థవంతంగా నిరోధించే మరియు బహుళ qPCR ప్రతిచర్యల యొక్క యాంప్లిఫికేషన్ సామర్థ్యాన్ని పెంచే కారకాలు జోడించబడ్డాయి, ప్రైమర్‌ల యాంప్లిఫికేషన్ సామర్థ్యాన్ని నిర్ధారించేటప్పుడు బహుళ ఫ్లోరోసెన్స్ క్వాంటిటేటివ్ యాంప్లిఫికేషన్‌ను ప్రారంభిస్తుంది.
భాగాలు
| పేరు |
| 1. లియో-బఫర్ |
| 2. లియో-ఎంజైమ్ మిక్స్ |
| 3. లియో ప్రొటెక్టెంట్ |
రవాణా పరిస్థితిఅయాన్
A: లియో-బఫర్ మరియు ప్రొటెక్టెంట్: -25~-15℃, షెల్ఫ్ జీవితం 1 సంవత్సరం.
B: లియో-ఎంజైమ్ మిక్స్, 2-8 ℃, షెల్ఫ్ జీవితం 6 నెలలు.
ఆపరేషన్ కోసం సూచన
1. రియాక్షన్ సిస్టమ్ (ఉదాహరణగా 25μL తీసుకోండి)
| భాగాలు | వాల్యూమ్ (μL) | చివరి ఏకాగ్రత |
| లియో-బఫర్ | 6 | 1* |
| లియో-ఎంజైమ్ మిక్స్ | 1 | - |
| లియో-ప్రొటెక్టెంట్ | 8 | - |
| ప్రైమర్ మిక్స్ (10μM) | 1 | 0.1- 1uM |
| ప్రోబ్ మిక్స్ (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
| RNA టెంప్లేట్ | 5 | - |
| DEPC H2O | 25 వరకు | - |
2. ఆప్టిమైజ్ చేసిన సైక్లింగ్ ప్రోటోకాల్
1) ప్రామాణిక సైక్లింగ్ ప్రోటోకాల్
| ప్రతిచర్య దశ | ఉష్ణోగ్రత | సమయం | చక్రం | |
| 1 | రివర్స్ ట్రాన్స్క్రిప్షన్ | 50°Ca | 10నిమి | 1 |
| 2 | ప్రారంభ డీనాటరేషన్ | 95°C | 5నిమి | 1 |
| 3 | యాంప్లిఫికేషన్ రియాక్షన్ | 95°C | 15సె | 45 చక్రాలు |
| 60°Cb | 30సెc |
2) ఫాస్ట్ సైక్లింగ్ ప్రోటోకాల్
|
| ప్రతిచర్య దశ | ఉష్ణోగ్రత | సమయం | చక్రం |
| 1 | రివర్స్ ట్రాన్స్క్రిప్షన్ | 50°Ca | 2నిమి | 1 |
| 2 | ప్రారంభ డీనాటరేషన్ | 95°C | 2సె | 1 |
| 3 | యాంప్లిఫికేషన్ రియాక్షన్ | 95°C | 1సెక |
45 చక్రాలు |
| 60°Cb | 13సెc |
గమనిక:
a) రివర్స్ లిప్యంతరీకరణ: ఉష్ణోగ్రత 10-15 నిమిషాలకు 42°C లేదా 50°Cని ఎంచుకోవచ్చు.
b) యాంప్లిఫికేషన్ రియాక్షన్: డిజైన్ చేయబడిన ప్రైమర్‌ల Tm విలువ ప్రకారం ఉష్ణోగ్రత సర్దుబాటు చేయబడుతుంది.
సి)ఫ్లోరోసెన్స్ సిగ్నల్ సముపార్జన: దయచేసి అవసరాలకు అనుగుణంగా ప్రయోగాత్మక విధానాన్ని సెట్ చేయండిసాధన మాన్యువల్.
సాంకేతిక సమాచారం/స్పెసిఫికేషన్‌లు
| హాట్ స్టార్ట్ | అంతర్నిర్మిత హాట్ ప్రారంభం |
| గుర్తింపు పద్ధతి | ప్రైమర్-ప్రోబ్ డిటెక్షన్ |
| PCR పద్ధతి | ఒక దశ RT-qPCR |
| నమూనా రకం | RNA |
గమనికలు
1. ఈ ఉత్పత్తి పరిశోధన ఉపయోగం కోసం మాత్రమే.
2. మీ ఆరోగ్యం మరియు భద్రతను నిర్ధారించడానికి దయచేసి అవసరమైన PPE, అటువంటి ల్యాబ్ కోటు మరియు చేతి తొడుగులు ధరించండి!
