ఆర్నేస్ ఇన్హిబిటర్ (గ్లిసరాల్ లేనిది)
మురిన్ RNase ఇన్హిబిటర్ అనేది రీకాంబినెంట్ మురైన్ RNase ఇన్హిబిటర్, ఇది E.coli నుండి వ్యక్తీకరించబడింది మరియు శుద్ధి చేయబడుతుంది.ఇది సమయోజనీయ బంధం ద్వారా 1:1 నిష్పత్తిలో RNase A, B లేదా Cతో బంధిస్తుంది, తద్వారా మూడు ఎంజైమ్‌ల కార్యకలాపాలను నిరోధిస్తుంది మరియు RNA క్షీణత నుండి రక్షిస్తుంది.అయినప్పటికీ, ఇది ఆస్పర్‌గిల్లస్ నుండి RNase 1, RNase T1, S1 న్యూక్లీస్, RNase H లేదా RNaseకి వ్యతిరేకంగా ప్రభావవంతంగా ఉండదు.మురిన్ RNase నిరోధకం RT-PCR, RT-qPCR మరియు IVT mRNA ద్వారా పరీక్షించబడింది మరియు వివిధ వాణిజ్య రివర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్టేజ్‌లు, DNA పాలిమరేసెస్ మరియు RNA పాలిమరేసెస్‌లకు అనుకూలంగా ఉంది.
మానవ RNase నిరోధకాలతో పోలిస్తే, మురైన్ RNase ఇన్హిబిటర్ రెండు సిస్టీన్‌లను కలిగి ఉండదు, ఇవి ఆక్సీకరణకు అధిక సున్నితత్వాన్ని కలిగి ఉంటాయి, ఇది నిరోధకాన్ని నిష్క్రియం చేస్తుంది.ఇది తక్కువ DTT (1 mM కంటే తక్కువ) సాంద్రతలలో స్థిరంగా ఉంటుంది.DTT యొక్క అధిక సాంద్రతలు ప్రతిచర్యకు ప్రతికూలంగా ఉన్న ప్రతిచర్యలలో (ఉదా రియల్-టైమ్ RT-PCR) ఉపయోగించడానికి ఈ ఫీచర్ దీన్ని అనుకూలంగా చేస్తుంది.
Aఅప్లికేషన్
RNA క్షీణతను నివారించడానికి RNase జోక్యం సాధ్యమయ్యే ఏదైనా ప్రయోగంలో ఈ ఉత్పత్తిని విస్తృతంగా ఉపయోగించవచ్చు, అవి:
1.ఫస్ట్-స్ట్రాండ్ cDNA సింథసిస్, RT-PCR, RT-qPCR, మొదలైనవి;
2.ఇన్-విట్రో ట్రాన్స్‌క్రిప్షన్/ట్రాన్స్‌లేషన్‌లో అధోకరణం నుండి RNAని రక్షించండి (ఉదా. విట్రోలో వైరల్ రెప్లికేషన్);
3.RNA ఐసోలేషన్ మరియు శుద్దీకరణ సమయంలో RNase కార్యాచరణను నిరోధించడం.
నిల్వ పరిస్థితులు
-25～-15℃ వద్ద నిల్వ చేయండి;
ఫ్రీజ్-థా సైకిల్స్ ≤ 5 సార్లు;
1 సంవత్సరానికి చెల్లుబాటు అవుతుంది.
యూనిట్ నిర్వచనం
5 ng RNase A యొక్క కార్యాచరణను 50% నిరోధించడానికి అవసరమైన RNase ఇన్హిబిటర్ మొత్తంగా ఒక యూనిట్ నిర్వచించబడింది.
పరమాణు బరువు
RNase ఇన్హిబిటర్ (గ్లిసరాల్ లేనిది) 50 kDa ప్రోటీన్.
నాణ్యత నియంత్రణ
ఎక్సోన్యూకలీస్ కార్యాచరణ:
37°C వద్ద 16 గంటలపాటు 1 μg λ-హింద్ III డైజెస్ట్ DNAతో 40 U ఎంజైమ్‌ను పొదిగించడం వలన జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ద్వారా నిర్ణయించబడిన DNA యొక్క గుర్తించదగిన క్షీణత లేదు.
ఎండోన్యూక్లీస్ కార్యాచరణ:
37°C వద్ద 16 గంటలపాటు 1 μg λ DNAతో 40 U ఎంజైమ్‌ని పొదిగించడం వలన జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ద్వారా నిర్ణయించబడిన DNA యొక్క గుర్తించదగిన క్షీణత ఏర్పడలేదు.
నిక్కింగ్ కార్యాచరణ:
37℃ వద్ద 16 గంటలపాటు 1 μg pBR322తో 40 U ఎంజైమ్‌ను పొదిగించడం వలన జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ద్వారా నిర్ణయించబడిన DNA యొక్క గుర్తించదగిన క్షీణత లేదు.
RNase కార్యాచరణ:
40 U ఎంజైమ్‌ను 1.6 μg MS2 RNAతో 4 గంటలపాటు 37℃ వద్ద పొదిగించడం వలన జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ద్వారా నిర్ణయించబడిన RNA యొక్క గుర్తించదగిన క్షీణత లేదు.
E.కోలి DNA:
TaqMan qPCR ద్వారా 40 U ఎంజైమ్ కనుగొనబడింది.E.coli DNA ≤ 0. 1pg/40U.
Nఓటేs
1.ఎంజైమ్ క్రియారహితం కాకుండా నిరోధించడానికి వణుకు లేదా హింసాత్మకంగా కదిలించవద్దు.
2.RNase ఇన్హిబిటర్ 25℃ నుండి 55℃ వరకు ఉష్ణోగ్రతల వద్ద చురుకుగా ఉంటుంది మరియు ≥65℃ వద్ద క్రియారహితం చేయబడుతుంది.
3.RNase H, RNase 1 మరియు RNase T1 యొక్క కార్యాచరణ నిరోధించబడదు.
4.RNase కార్యాచరణను నిరోధించే pH పరిధి విస్తృతమైనది (pH 5-9 వద్ద క్రియాశీలంగా ఉంటుంది), pH 7-8 వద్ద గరిష్ట కార్యాచరణను ప్రదర్శిస్తుంది.
