ఒక దశ RT-qPCR SYBR గ్రీన్ ప్రీమిక్స్
పిల్లి సంఖ్య: HCB5140A
ఒక దశ RT-qPCR సైబర్ గ్రీన్ ప్రీమిక్స్ అనేది SYBR గ్రీన్ I డై ఆధారంగా ఫ్లోరోసెన్స్ క్వాంటిఫికేషన్ కోసం.జన్యు-నిర్దిష్ట ప్రైమర్లను ఉపయోగించి, రివర్స్ ట్రాన్స్క్రిప్షన్ మరియు qPCR ప్రతిచర్యలు ఒక ట్యూబ్లో పూర్తవుతాయి, పునరావృత క్యాప్-ఓపెనింగ్ మరియు పైపెటింగ్ ఆపరేషన్ల అవసరాన్ని తొలగిస్తాయి, పరీక్ష సామర్థ్యాన్ని బాగా మెరుగుపరుస్తాయి మరియు కాలుష్య ప్రమాదాన్ని తగ్గిస్తాయి.RNA నమూనాల కోసం, కిట్ సమర్థవంతమైన cDNA సంశ్లేషణ కోసం వేడి-నిరోధక రివర్స్ ట్రాన్స్క్రిప్టేజ్ను మరియు పరిమాణాత్మక విస్తరణ కోసం హాట్స్టార్ట్ టాక్ DNA పాలిమరేస్ను ఉపయోగిస్తుంది.ఆప్టిమైజ్ చేయబడిన బఫర్ సిస్టమ్ కింద, కిట్ యొక్క సున్నితత్వం ఎక్కువగా వ్యక్తీకరించబడిన లక్ష్యాలకు 0.1 pg మరియు మధ్యస్తంగా వ్యక్తీకరించబడిన లక్ష్యాలకు 1 pg వరకు ఎక్కువగా ఉంటుంది.DNA నమూనాల విస్తరణ మరియు పరిమాణీకరణకు కిట్ అనుకూలంగా ఉంటుంది.ఇది వివిధ మొక్కలు మరియు జంతువుల నమూనాలు, కణాలు మరియు సూక్ష్మజీవుల నుండి న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాల యొక్క సున్నితమైన గుర్తింపు మరియు పరిమాణాన్ని అనుమతిస్తుంది.
భాగాలు
No | పేరు | వాల్యూమ్ | వాల్యూమ్ |
1 | అధునాతన బఫర్ | 250 μL | 2×1.25 మి.లీ |
2 | అధునాతన ఎంజైమ్ మిక్స్ | 20 μL | 200 μL |
3 | RNase ఉచిత H2O | 250 μL | 2×1.25 మి.లీ |
నిల్వ పరిస్థితులు
ఈ ఉత్పత్తిని 1 సంవత్సరం పాటు కాంతికి దూరంగా -25~-15℃ వద్ద నిల్వ చేయాలి.
సూచనలు
1.రియాక్షన్ సిస్టమ్ కాన్ఫిగరేషన్d
భాగాలు | వాల్యూమ్ (μL) | వాల్యూమ్ (μL) | చివరి ఏకాగ్రత |
అధునాతన బఫర్ | 12.5 | 25 | 1× |
అధునాతన ఎంజైమ్ మిక్స్ | 1 | 2 | - |
ఫార్వర్డ్ ప్రైమర్ (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
రివర్స్ ప్రైమర్ (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
RNA టాంప్లేట్b | X | X | - |
RNase ఉచిత H2ఓc | 25 వరకు | 50 వరకు | - |
గమనికలు:
1) a.టిఅతను చివరి ప్రైమర్ ఏకాగ్రత 0.2 μmol/L, ఇది సముచితంగా 0.1 మరియు 1μmol/L మధ్య కూడా సర్దుబాటు చేయబడుతుంది.
2) బి.రియాజెంట్ చాలా సున్నితమైనది, మొత్తం RNA 1pg-1μg పరిధిలో ఉంటుంది మరియు మానవ నమూనాల పరీక్ష 1 pg-100 ng యొక్క సరైన ఇన్పుట్ను చూపించింది, మొత్తం Ct విలువను 15-30 పరిధిలో నియంత్రించబడుతుంది.
3) సి.లక్ష్య జన్యు విస్తరణ యొక్క చెల్లుబాటు మరియు పునరుత్పత్తిని నిర్ధారించడానికి 20μL లేదా 50μLని ఉపయోగించమని సిఫార్సు చేయబడింది.
4) డి.దయచేసి అల్ట్రా-క్లీన్ బెంచ్లో సిద్ధం చేయండి మరియు న్యూక్లీజ్ అవశేషాలు లేని చిట్కాలు మరియు రియాక్షన్ ట్యూబ్లను ఉపయోగించండి;ఫిల్టర్ కాట్రిడ్జ్లతో చిట్కాలు సిఫార్సు చేయబడ్డాయి.క్రాస్ కాలుష్యం మరియు ఏరోసోల్ కాలుష్యాన్ని నివారించండి.
2.ప్రతిచర్య కార్యక్రమం
సైకిల్ దశ | టెంప్ | సమయం | సైకిళ్లు |
రివర్స్ ట్రాన్స్క్రిప్షన్ | 50℃a | 6 నిమిషాలు | 1 |
ప్రారంభ డీనాటరేషన్ | 95℃ | 5 నిమిషాలు | 1 |
యాంప్లిఫికేషన్ రియాక్షన్ | 95℃ | 15 సె | 40 |
60℃b | 30 సె | ||
మెల్టింగ్ కర్వ్ దశ | పరికరం డిఫాల్ట్లు | 1 |
గమనికలు:
1) a.ప్రయోగాత్మక అవసరాలకు అనుగుణంగా రివర్స్ ట్రాన్స్క్రిప్షన్ ఉష్ణోగ్రత 50-55°C మధ్య ఎంచుకోవచ్చు.DNA నమూనాల కోసం, రివర్స్ ట్రాన్స్క్రిప్షన్ ప్రక్రియను విస్మరించవచ్చు.
2) బి.ప్రత్యేక సందర్భాలలో ఎనియలింగ్/ఎక్స్టెన్షన్ ఉష్ణోగ్రతను ప్రైమర్ Tm విలువ ప్రకారం సర్దుబాటు చేయవచ్చు, 60°C సిఫార్సు చేయబడింది.
గమనికలు
1. ఈ ఉత్పత్తి పరిశోధన ఉపయోగం కోసం మాత్రమే.
2. దయచేసి మీ భద్రత కోసం ల్యాబ్ కోట్లు మరియు డిస్పోజబుల్ గ్లోవ్స్తో ఆపరేట్ చేయండి.