అల్ట్రా న్యూక్లీస్
UltraNuclease అనేది సెరాటియా మార్సెసెన్స్ నుండి ఉద్భవించిన జన్యుపరంగా ఇంజినీరింగ్ చేయబడిన ఎండోన్యూక్లేస్, ఇది DNA లేదా RNA లను అధోకరణం చేయగలదు, ఇది డబుల్ లేదా సింగిల్ స్ట్రాండెడ్, లీనియర్ లేదా వృత్తాకారంలో విస్తృత శ్రేణిలో, న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలను పూర్తిగా 5'-మోనోక్లీఫాస్ఫేట్ 3-న్యూక్లియోఫాస్ఫేట్ ఒలిగోతో 5' పొడవుతో క్షీణింపజేస్తుంది. .జన్యు ఇంజనీరింగ్ మార్పు తర్వాత, ఉత్పత్తిని ఎస్చెరిచియా కోలి (E. కోలి)లో పులియబెట్టడం, వ్యక్తీకరించడం మరియు శుద్ధి చేయడం జరిగింది, ఇది సెల్ సూపర్నాటెంట్ మరియు సెల్ లైసేట్ శాస్త్రీయ పరిశోధన యొక్క స్నిగ్ధతను తగ్గిస్తుంది, కానీ ప్రొటీన్ యొక్క శుద్ధీకరణ సామర్థ్యాన్ని మరియు క్రియాత్మక పరిశోధనను మెరుగుపరుస్తుంది.జన్యు చికిత్స, వైరస్ శుద్దీకరణ, టీకా ఉత్పత్తి, ప్రొటీన్ మరియు పాలిసాకరైడ్ ఔషధ పరిశ్రమలో హోస్ట్ అవశేష న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ రిమూవల్ రియాజెంట్గా కూడా దీనిని ఉపయోగించవచ్చు.
ఉత్పత్తి లక్షణాలు
CAS నం. | 9025-65-4 |
EC నం. | |
పరమాణు బరువు | 30kDa |
ఐసోఎలెక్ట్రిక్ పాయింట్ | 6.85 |
ప్రోటీన్ స్వచ్ఛత | ≥99% ( SDS-PAGE & SEC-HPLC) |
నిర్దిష్ట కార్యాచరణ | ≥1.1×106U/mg |
వాంఛనీయ ఉష్ణోగ్రత | 37°C |
వాంఛనీయ pH | 8.0 |
ప్రోటీజ్ యాక్టివిటీ | ప్రతికూల |
బయోబర్డెన్ | 10CFU/100,000U |
అవశేష హోస్ట్-సెల్ ప్రోటీన్ | ≤10ppm |
హెవీ మెటల్ | ≤10ppm |
బాక్టీరియల్ ఎండోటాక్సిన్ | 0.25EU/1000U |
నిల్వ బఫర్ | 20mM Tris-HCl, pH 8.0, 2mM MgCl2 , 20mM NaCl, 50% గ్లిసరాల్ |
నిల్వ పరిస్థితులు
≤0°C రవాణా;-25~-15°C నిల్వ,2 సంవత్సరాల చెల్లుబాటు (గడ్డకట్టడం-కరిగించడం నివారించండి).
యూనిట్ నిర్వచనం
△A260 యొక్క శోషణ విలువను 30 నిమిషాలలో 37 °C వద్ద 1.0 ద్వారా మార్చడానికి ఉపయోగించే ఎంజైమ్, pH 8.0, ఒలిగోన్యూక్లియోటైడ్లుగా కత్తిరించడం ద్వారా జీర్ణమైన 37μg సాల్మన్ స్పెర్మ్ DNAకి సమానం, ఇది క్రియాశీల యూనిట్ (U)గా నిర్వచించబడింది.
నాణ్యత నియంత్రణ
అవశేష హోస్ట్-సెల్ ప్రోటీన్: ELISA కిట్
•ప్రొటీజ్ అవశేషాలు: 250KU/mL UltraNuclease 60నిమిషాల పాటు సబ్స్ట్రేట్తో చర్య జరిపింది, ఎటువంటి కార్యాచరణ కనుగొనబడలేదు.
•బాక్టీరియల్ ఎండోటాక్సిన్: LAL-Test, Pharmacopoeia ఆఫ్ ది పీపుల్స్ రిపబ్లిక్ ఆఫ్ చైనా వాల్యూమ్ 4 (2020 ఎడిషన్) జెల్ పరిమితి పరీక్ష పద్ధతి.సాధారణ నియమాలు (1143).
•జీవ భారం: పీపుల్స్ రిపబ్లిక్ ఆఫ్ చైనా యొక్క ఫార్మకోపోయియా వాల్యూమ్ 4 (2020 ఎడిషన్)— జనరల్
స్టెరిలిటీ టెస్ట్ కోసం నియమాలు (1101), PRC నేషనల్ స్టాండర్డ్, GB 4789.2-2016.
•హెవీ మెటల్:ICP-AES, HJ776-2015.
ఆపరేషన్
SDS ఏకాగ్రత 0.1% లేదా EDTA కంటే ఎక్కువగా ఉన్నప్పుడు UltraNuclease కార్యాచరణ గణనీయంగా నిరోధించబడుతుంది
ఏకాగ్రత 1mM కంటే ఎక్కువగా ఉంది. సర్ఫ్యాక్టెంట్ ట్రిటాన్ X- 100, మధ్య 20 మరియు మధ్య 80 న్యూక్లీస్పై ప్రభావం చూపలేదు
ఏకాగ్రత 1.5% కంటే తక్కువగా ఉన్నప్పుడు లక్షణాలు.
ఆపరేషన్ | ఆప్టిమల్ ఆపరేషన్ | చెల్లుబాటు అయ్యే ఆపరేషన్ |
ఉష్ణోగ్రత | 37℃ | 0-45℃ |
pH | 8.0-9.2 | 6.0- 11.0 |
Mg2+ | 1-2మి.మీ | 1- 15మి.మీ |
DTT | 0- 100మి.మీ | >100మి.మీ |
2-మెర్కాప్టోఇథనాల్ | 0- 100మి.మీ | >100మి.మీ |
మోనోవాలెంట్ మెటల్ అయాన్ (Na+, K+ మొదలైనవి) | 0-20మి.మీ | 0-200మి.మీ |
PO43- | 0- 10మి.మీ | 0- 100మి.మీ |
వినియోగం మరియు మోతాదు
• వ్యాక్సిన్ ఉత్పత్తుల నుండి ఎక్సోజనస్ న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ను తొలగించండి, అవశేష న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ టాక్సిసిటీ ప్రమాదాన్ని తగ్గిస్తుంది మరియు ఉత్పత్తి భద్రతను మెరుగుపరుస్తుంది.
• న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ వల్ల కలిగే ఫీడ్ లిక్విడ్ యొక్క స్నిగ్ధతను తగ్గించండి, ప్రాసెసింగ్ సమయాన్ని తగ్గించండి మరియు ప్రోటీన్ దిగుబడిని పెంచుతుంది.
• కణాన్ని చుట్టిన న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ను తొలగించండి (వైరస్, ఇన్క్లూజన్ బాడీ మొదలైనవి), ఇది అనుకూలంగా ఉంటుంది
కణాల విడుదల మరియు శుద్దీకరణకు.
ప్రయోగాత్మక రకం | ప్రోటీన్ ఉత్పత్తి | వైరస్, టీకా | సెల్ డ్రగ్స్ |
సెల్ల సంఖ్య | 1 గ్రా సెల్ తడి బరువు (10ml బఫర్తో మళ్లీ సస్పెండ్ చేయబడింది) | 1L కిణ్వ ప్రక్రియ ద్రవ సూపర్నాటెంట్ | 1L సంస్కృతి |
కనీస మోతాదు | 250U | 100U | 100U |
సిఫార్సు చేయబడిన మోతాదు | 2500U | 25000U | 5000U |
• న్యూక్లీస్ చికిత్స కాలమ్ క్రోమాటోగ్రఫీ, ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ మరియు బ్లాటింగ్ విశ్లేషణ కోసం నమూనా యొక్క రిజల్యూషన్ మరియు రికవరీని మెరుగుపరుస్తుంది.
• జన్యు చికిత్సలో, శుద్ధి చేయబడిన అడెనో-అనుబంధ వైరస్లను పొందేందుకు న్యూక్లియిక్ ఆమ్లం తీసివేయబడుతుంది.