రోబస్టార్ట్ టాక్ DNA పాలిమరేస్

Robustart Taq DNA పాలిమరేస్ ఒక హాట్ స్టార్ట్ DNA పాలిమరేస్.ఈ ఉత్పత్తి PCR సిస్టమ్ తయారీ మరియు యాంప్లిఫికేషన్ ప్రక్రియలో ప్రైమర్‌లు లేదా ప్రైమర్ అగ్రిగేషన్ యొక్క నాన్-స్పెసిఫిక్ ఎనియలింగ్ వల్ల ఏర్పడే నాన్-స్పెసిఫిక్ రియాక్షన్‌ను బాగా నిరోధించడమే కాదు.అందువల్ల, ఇది అద్భుతమైన నిర్దిష్టతను కలిగి ఉంది మరియు తక్కువ సాంద్రత కలిగిన టెంప్లేట్‌ల విస్తరణకు మరింత ప్రభావవంతంగా ఉంటుంది మరియు ఇది మల్టీప్లెక్స్డ్ PCR యాంప్లిఫికేషన్ రియాక్షన్‌కు అనుకూలంగా ఉంటుంది.అంతేకాకుండా, ఈ ఉత్పత్తి చాలా మంచి అనువర్తనాన్ని కలిగి ఉంది మరియు వివిధ రకాల PCR ప్రతిచర్యలలో స్థిరమైన విస్తరణ ఫలితాలను పొందవచ్చు.

భాగాలు

1.5 U/μL రోబస్టార్ట్ టాక్ DNA పాలిమరేస్

2.10 × PCR బఫర్ II (Mg²+ ఉచితం) (ఐచ్ఛికం)

3.25 mM MgCl₂(ఐచ్ఛికం)

* 10 × PCR బఫర్ II (Mg²+ ఉచితం) dNTP మరియు Mg²+ కలిగి లేదు, దయచేసి dNTPలు మరియు MgCl జోడించండి₂ప్రతిచర్య వ్యవస్థను సిద్ధం చేసేటప్పుడు.

సిఫార్సు చేసిన అప్లికేషన్లు

1.వేగవంతమైన విస్తరణ.

2.బహుళ విస్తరణ.

3.రక్తం, శుభ్రముపరచు మరియు ఇతర నమూనాల ప్రత్యక్ష విస్తరణ.

4.శ్వాసకోశ వ్యాధుల గుర్తింపు.

నిల్వ పరిస్థితి

దీర్ఘకాలిక నిల్వ కోసం -20°C, ఉపయోగం ముందు బాగా కలపాలి, తరచుగా ఫ్రీజ్-కరిగించడం నివారించండి.

*శీతలీకరణ తర్వాత అవపాతం సంభవిస్తే, అది సాధారణం;మిక్సింగ్ మరియు ఉపయోగం ముందు గది ఉష్ణోగ్రతకు సమం చేయాలని సిఫార్సు చేయబడింది.

యూనిట్ నిర్వచనం

ఒక క్రియాశీల యూనిట్ (U) అనేది 10 nmol డియోక్సిరిబోన్యూక్లియోటైడ్‌ని యాసిడ్-కరగని పదార్థంలో 74°C వద్ద 30 నిమిషాల పాటు యాక్టివేట్ చేసిన సాల్మన్ స్పెర్మ్ DNAని టెంప్లేట్/ప్రైమర్‌గా ఉపయోగించుకునే ఎంజైమ్ మొత్తంగా నిర్వచించబడింది.

నాణ్యత నియంత్రణ

1.SDS-PAGE ఎలెక్ట్రోఫోరేటిక్ స్వచ్ఛత 98% కంటే ఎక్కువ.

2.యాంప్లిఫికేషన్ సెన్సిటివిటీ, బ్యాచ్-టు-బ్యాచ్ నియంత్రణ, స్థిరత్వం.

3.ఎక్సోజనస్ న్యూక్లీస్ యాక్టివిటీ లేదు, ఎక్సోజనస్ ఎండోన్యూకలీస్ లేదా ఎక్సోన్యూకలీస్ కాలుష్యం లేదు

సూచనలు

ప్రతిచర్య సెటప్

గమనికలు:

1) a.బఫర్‌లో dNTP మరియు Mg²+ లేవు, దయచేసి dNTPలు మరియు MgClని జోడించండి₂ప్రతిచర్య వ్యవస్థను సిద్ధం చేసేటప్పుడు.

2) బి.qPCR/qRT-PCR కోసం ఉపయోగించినట్లయితే, ప్రతిచర్య వ్యవస్థకు ఫ్లోరోసెంట్ ప్రోబ్స్ జోడించబడాలి.సాధారణంగా, 0.2 μM తుది ప్రైమర్ ఏకాగ్రత మంచి ఫలితాలను ఇస్తుంది;ప్రతిచర్య పనితీరు తక్కువగా ఉంటే, ప్రైమర్ ఏకాగ్రతను 0.2-1 μM పరిధిలో సర్దుబాటు చేయవచ్చు.ప్రోబ్ ఏకాగ్రత సాధారణంగా 0.1-0.3 μM పరిధిలో ఆప్టిమైజ్ చేయబడుతుంది.ప్రైమర్ మరియు ప్రోబ్ యొక్క ఉత్తమ కలయికను కనుగొనడానికి ఏకాగ్రత ప్రవణత ప్రయోగాలు చేయవచ్చు.

థర్మల్ సైక్లింగ్ ప్రోటోకాల్

గమనికలు

1.వేగవంతమైన DNA పాలిమరేస్ యొక్క విస్తరణ రేటు 1 kb/10 s కంటే తక్కువ ఉండకూడదు.ఉష్ణోగ్రత పెరుగుదల మరియు పతనం రేటు, ఉష్ణోగ్రత నియంత్రణ మోడ్ మరియు వివిధ PCR సాధనాల ఉష్ణ వాహక సామర్థ్యం చాలా తేడా ఉంటుంది, కాబట్టి నిర్దిష్ట వేగవంతమైన PCR పరికరం కోసం సరైన ప్రతిచర్య పరిస్థితులను ఆప్టిమైజ్ చేయాలని సిఫార్సు చేయబడింది.

2.సిస్టమ్ అధిక నిర్దిష్టత మరియు సున్నితత్వంతో అత్యంత అనుకూలమైనది.

3.హై సెన్సిటివిటీ PCR డిటెక్షన్ రియాజెంట్‌లుగా ఉపయోగించడానికి అనుకూలం మరియు మల్టీప్లెక్స్ PCR యాంప్లిఫికేషన్ రియాక్షన్‌లలో ఉపయోగించవచ్చు.

4.5′→3′ పాలిమరేస్ యాక్టివిటీ, 5′→3′ ఎక్సోన్యూకలీస్ యాక్టివిటీ;సంఖ్య 3′→5′ ఎక్సోన్యూకలీస్ కార్యాచరణ;ప్రూఫ్ రీడింగ్ ఫంక్షన్ లేదు.

5.PCR మరియు RT-PCR యొక్క గుణాత్మక మరియు పరిమాణాత్మక పరీక్షలకు అనుకూలం.

6.PCR ఉత్పత్తి యొక్క 3′ ముగింపు A, ఇది నేరుగా T వెక్టర్‌లోకి క్లోన్ చేయబడుతుంది.

7.మూడు-దశల పద్ధతి తక్కువ ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రతలు కలిగిన ప్రైమర్‌లకు లేదా 200 bp కంటే ఎక్కువ శకలాలు విస్తరించడానికి సిఫార్సు చేయబడింది.