CHO HCP ELISA కిట్

ఈ పరీక్షలో ఒక-దశ ఇమ్యునోసోర్బెంట్ ELISA పద్ధతి ఉపయోగించబడుతుంది.CHOK1 HCPని కలిగి ఉన్న నమూనాలు ఏకకాలంలో HRP-లేబుల్ చేయబడిన మేక యాంటీ-CHOK1 యాంటీబాడీ మరియు ELISA ప్లేట్‌పై పూసిన యాంటీ-CHOK1 యాంటీబాడీతో ప్రతిస్పందిస్తాయి, చివరకు సాలిడ్-ఫేజ్ యాంటీబాడీ-HCP-లేబుల్ యాంటీబాడీ యొక్క శాండ్‌విచ్ కాంప్లెక్స్‌ను ఏర్పరుస్తాయి.ELISA ప్లేట్‌ను కడగడం ద్వారా అన్‌బౌండ్ యాంటీజెన్-యాంటీబాడీని తొలగించవచ్చు.తగినంత ప్రతిచర్య కోసం TMB సబ్‌స్ట్రేట్ బావికి జోడించబడుతుంది.స్టాప్ సొల్యూషన్‌ని జోడించిన తర్వాత రంగు అభివృద్ధి ఆగిపోతుంది మరియు 450/650nm వద్ద రియాక్షన్ సొల్యూషన్ యొక్క OD లేదా శోషణ విలువ మైక్రోప్లేట్ రీడర్‌తో చదవబడుతుంది.OD విలువ లేదా శోషణ విలువ ద్రావణంలోని HCP కంటెంట్‌కు అనులోమానుపాతంలో ఉంటుంది.దీని నుండి, ద్రావణంలో HCP ఏకాగ్రతను ప్రామాణిక వక్రరేఖ ప్రకారం లెక్కించవచ్చు.

అప్లికేషన్

నమూనాలలో CHOK1 హోస్ట్ సెల్ ప్రోటీన్ అవశేషాల కంటెంట్‌ను పరిమాణాత్మకంగా గుర్తించడానికి ఈ కిట్ ఉపయోగించబడుతుంది.

Cప్రత్యర్థులు

సామగ్రి అవసరం

నిల్వ మరియు స్థిరత్వం

1.-25~-15°C వద్ద రవాణా.

2.నిల్వ పరిస్థితులు టేబుల్ 1లో చూపిన విధంగా ఉన్నాయి;1-2 భాగాలు ≤–20°C, 5-6 నిల్వ చేయబడతాయి RT,3、4,7,8 2-8℃ వద్ద నిల్వ చేయబడతాయి;చెల్లుబాటు వ్యవధి 12 నెలలు.

ఉత్పత్తి పారామితులు

1.సున్నితత్వం: 1ng/mL

2.గుర్తింపు పరిధి: 3- 100ng/mL

3.ఖచ్చితత్వం: ఇంట్రా-అస్సే CV≤ 10%, ఇంటర్-అస్సే CV≤ 15%

4.HCP కవరేజ్: >80%

5.విశిష్టత: ఈ కిట్ సార్వత్రికమైనది ఎందుకంటే ఇది ప్రత్యేకంగా శుద్ధి ప్రక్రియతో సంబంధం లేకుండా CHOK1 HCPతో ప్రతిస్పందిస్తుంది.

రియాజెంట్ తయారీ

1.PBST 0.05%

15 ml 20×PBST 0.05% తీసుకోండి, ddHలో కరిగించబడుతుంది₂O, మరియు 300 ml వరకు తయారు చేయబడింది.

2.1.0% BSA

సీసా నుండి 1g BSA తీసుకోండి మరియు 100 ml PBST 0.05% లో పలుచన చేయండి, పూర్తిగా కరిగిపోయే వరకు బాగా కలపండి మరియు 2-8 ° C వద్ద నిల్వ చేయండి.సిద్ధం చేయబడిన పలుచన బఫర్ 7 రోజుల వరకు చెల్లుబాటు అవుతుంది.ఇది అవసరమైన విధంగా సిద్ధం చేయాలని సిఫార్సు చేయబడింది.

3.డిటెక్షన్ సొల్యూషన్ 2μg/mL

48μL 0.5 mg/mL యాంటీ-CHO HCP-HRP తీసుకోండి మరియు 2μg/mL డిటెక్షన్ సొల్యూషన్ యొక్క తుది సాంద్రతను పొందేందుకు 1% BSA యొక్క 11,952μLలో పలుచన చేయండి.

4.QC మరియు CHOK1 HCP ప్రమాణాల తయారీ

పట్టిక: QC మరియు ప్రమాణాల తయారీ 

పరీక్షా విధానం

1.పైన “రియాజెంట్ ప్రిపరేషన్”లో సూచించిన విధంగా రియాజెంట్‌లను సిద్ధం చేయండి.

2.ప్రతి బావిలో 50μL ప్రమాణాలు, నమూనాలు మరియు QCలను (టేబుల్ 3 చూడండి) తీసుకోండి, ఆపై 100μL డిటెక్షన్ సొల్యూషన్ (2μg/mL) జోడించండి;సీలర్‌తో ప్లేట్‌ను కవర్ చేయండి మరియు ELISA ప్లేట్‌ను థర్మోమిక్సర్‌పై ఉంచండి.2 గంటల పాటు 500rpm, 25±3℃ వద్ద పొదిగే.

3.సింక్‌లోని మైక్రోప్లేట్‌ను విలోమం చేయండి మరియు పూత ద్రావణాన్ని విస్మరించండి.ELISA ప్లేట్‌ను కడగడానికి మరియు ద్రావణాన్ని విస్మరించడానికి ప్రతి బావిలో PBST 0.05% పైపెట్ 300μL వేయండి మరియు వాషింగ్‌ను 3 సార్లు పునరావృతం చేయండి.శుభ్రమైన కాగితపు టవల్ మీద ప్లేట్‌ను తిప్పండి మరియు పొడిగా ఉంచండి.

4.ప్రతి బావికి 100μL TMB సబ్‌స్ట్రేట్ (టేబుల్ 1 చూడండి) జోడించండి, ELISA ప్లేట్‌ను మూసివేసి, 15 నిమిషాల పాటు 25±3℃ వద్ద చీకటిలో పొదిగేది.

5.ప్రతి బావిలో 100μL స్టాప్ సొల్యూషన్ పైపెట్ చేయండి.

6.మైక్రోప్లేట్ రీడర్‌తో 450/650nm తరంగదైర్ఘ్యం వద్ద శోషణను కొలవండి.

7.సాఫ్ట్‌మాక్స్ లేదా తత్సమాన సాఫ్ట్‌వేర్ ద్వారా డేటాను విశ్లేషించండి.నాలుగు-పారామీటర్ల లాజిస్టిక్ రిగ్రెషన్ మోడల్‌ని ఉపయోగించడం ద్వారా ప్రామాణిక వక్రతను ప్లాట్ చేయండి.

ప్రామాణిక వక్ర ఉదాహరణ

గమనిక: నమూనాలో HCP యొక్క ఏకాగ్రత ప్రామాణిక వక్రరేఖ యొక్క ఎగువ పరిమితిని మించి ఉంటే, దానిని పరీక్షించే ముందు డైల్యూషన్ బఫర్‌తో సరిగ్గా పలుచన చేయాలి.

గమనికలు

స్టాప్ సొల్యూషన్ 2M సల్ఫ్యూరిక్ యాసిడ్, దయచేసి స్ప్లాషింగ్‌ను నివారించడానికి జాగ్రత్తగా నిర్వహించండి!