BspQI
BspQI నిర్దిష్ట సైట్లను గుర్తించగల మరియు కింద ఉత్పత్తి చేయబడిన E. coliలో పునఃసంయోగంగా వ్యక్తీకరించబడుతుంది
BspQI, ఒక IIs పరిమితి ఎండోన్యూక్లీస్ పరిమితి ఎండోన్యూకలీస్, బాసిల్లస్ స్ఫేరికస్ నుండి క్లోన్ చేయబడిన మరియు సవరించబడిన BspQI జెన్ను కలిగి ఉండే రీకాంబినెంట్ E. కోలి జాతి నుండి తీసుకోబడింది.ఇది నిర్దిష్ట సైట్లను గుర్తించగలదు మరియు గుర్తింపు క్రమం మరియు క్లీవేజ్ సైట్లు క్రింది విధంగా ఉన్నాయి:
5' · · · · GCTCTTC(N) · · · · · · · · · · · · 3'
3' · · · · CGAGAAG(NNNN) · · · · 5'
ఉత్పత్తి లక్షణాలు
1. అధిక కార్యాచరణ, వేగవంతమైన జీర్ణక్రియ;
2. తక్కువ స్టార్ యాక్టివిటీ, "స్కాల్పెల్" వంటి ఖచ్చితమైన కట్టింగ్ను నిర్ధారిస్తుంది;
3. BSA లేకుండా మరియు జంతు మూలం ఉచితం;
మిథైలేషన్ సెన్సిటివిటీ
Dనేను మిథైలేషన్:సెన్సిటివ్ కాదు;
Dcm మిథైలేషన్:సెన్సిటివ్ కాదు;
CpG మిథైలేషన్:సెన్సిటివ్ కాదు;
నిల్వ పరిస్థితులు
ఉత్పత్తిని ≤ 0℃ షిప్పింగ్ చేయాలి;-25~- 15℃ పరిస్థితిలో నిల్వ చేయండి.
నిల్వ బఫర్
20mM Tris-HCl, 0.1mM EDTA, 500 mM KCl, 1.0 mM డిథియోత్రీటాల్, 500 µg/ml రీకాంబినెంట్ అల్బుమిన్, 0. 1% ట్రిషన్ X- 100 మరియు 50% గ్లిసరాల్ (pH 7.0 @ 25°C).
యూనిట్ నిర్వచనం
ఒక యూనిట్ మొత్తం 50 µL ప్రతిచర్య పరిమాణంలో 50°C వద్ద 1 గంటలో 1µg అంతర్గత నియంత్రణ DNAని జీర్ణం చేయడానికి అవసరమైన ఎంజైమ్ మొత్తంగా నిర్వచించబడింది.
నాణ్యత నియంత్రణ
ప్రోటీన్ స్వచ్ఛత పరీక్ష (SDS-PAGE):BspQI యొక్క స్వచ్ఛత SDS-PAGE విశ్లేషణ ద్వారా ≥95% నిర్ణయించబడింది.
RNase:50℃ వద్ద 4 గంటల పాటు 1.6μg MS2 RNAతో 10U BspQI అగరోజ్ జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ద్వారా నిర్ణయించిన విధంగా క్షీణతను అందించదు.
నాన్-స్పెసిఫిక్ DNase యాక్టివిటీ:16 గంటల పాటు 50℃ వద్ద 1μg λ DNAతో 10U BspQI, 1 గంటకు 50℃తో పోలిస్తే, అగరోజ్ జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ద్వారా నిర్ణయించిన విధంగా అదనపు DNA లభించదు.
లిగేషన్ మరియు రీకటింగ్:10U BspQIతో 1 μg λDNA జీర్ణం అయిన తర్వాత, DNA శకలాలు T4 DNA లిగేస్తో 16ºC వద్ద లిగేట్ చేయబడతాయి.మరియు ఈ లిగేటెడ్ శకలాలు BspQIతో మళ్లీ కత్తిరించబడతాయి.
E. కోలి DNA: E. coli 16s rDNA-నిర్దిష్ట TaqMan qPCR గుర్తింపు E.coli జన్యు అవశేషాలు ≤ 0.1pg/ul అని చూపించింది.
హోస్ట్ ప్రోటీన్ అవశేషాలు:≤ 50 ppm
బాక్టీరియల్ ఎండోటాక్సిన్: LAL-పరీక్ష, చైనీస్ ఫార్మకోపోయియా IV 2020 ఎడిషన్ ప్రకారం, జెల్ పరిమితి పరీక్ష పద్ధతి, సాధారణ నియమం (1143).బాక్టీరియల్ ఎండోటాక్సిన్ కంటెంట్ ≤10 EU/mg ఉండాలి.
ప్రతిచర్య వ్యవస్థ మరియు పరిస్థితులు
భాగం | వాల్యూమ్ |
BspQ I(10 U/μL) | 1 μL |
DNA | 1 μg |
10 x BspQ I బఫర్ | 5 μL |
dd H2O | 50 μL వరకు |
ప్రతిచర్య పరిస్థితులు: 50℃, 1~ 16 గం.
వేడి నిష్క్రియం: 20 నిమిషాలకు 80°C.
సిఫార్సు చేయబడిన ప్రతిచర్య వ్యవస్థ మరియు పరిస్థితులు సాపేక్షంగా మంచి ఎంజైమ్ జీర్ణక్రియ ప్రభావాన్ని అందించగలవు, ఇది సూచన కోసం మాత్రమే, దయచేసి వివరాల కోసం ప్రయోగాత్మక ఫలితాలను చూడండి.
ఉత్పత్తి అప్లికేషన్
పరిమితి ఎండోన్యూక్లీస్ జీర్ణక్రియ, వేగవంతమైన క్లోనింగ్.
గమనికలు
1. ఎంజైమ్ వాల్యూమ్ ≤ 1/10 ప్రతిచర్య వాల్యూమ్.
2. గ్లిసరాల్ గాఢత 5% కంటే ఎక్కువగా ఉన్నప్పుడు స్టార్ యాక్టివిటీ ఏర్పడవచ్చు.
3. సిఫార్సు చేసిన నిష్పత్తి కంటే తక్కువ సబ్స్ట్రేట్ చేసినప్పుడు క్లీవేజ్ యాక్టివిటీ సంభవించవచ్చు.