2×సెన్సీ డైరెక్ట్ ప్రీమిక్స్-UNG (ప్రోబ్ qPCR)

పిల్లి సంఖ్య: HCB5151A

SensiDirect Premix-UNG (ప్రోబ్ qPCR) DNA వెలికితీత లేదా నమూనా తయారీ లేకుండా నమూనాల నుండి నేరుగా PCR నిర్వహించడానికి రూపొందించబడింది.ఈ రియాజెంట్‌లో హాట్-స్టార్ట్ DNA పాలిమరేస్, యురేసిల్ DNA గ్లైకోసైలేస్ (UNG), RNase ఇన్హిబిటర్, MgCl ఉంటాయి.₂, dNTPలు (dTTPకి బదులుగా dUTPతో), మరియు పరిమాణాత్మక PCR (qPCR) కోసం స్టెబిలైజర్‌లు.ఈ రియాజెంట్ అధిక ఇన్హిబిటర్-టాలరెన్స్‌ని ఏర్పరుస్తుంది, అందువలన ఇది DNA వెలికితీత లేకుండా గొంతు శుభ్రముపరచు, లాలాజలం, యాంటీ కోగ్యులేటెడ్ హోల్ బ్లడ్, ప్లాస్మా మరియు సీరం వంటి నమూనాలను గుర్తించడానికి నేరుగా వర్తించబడుతుంది.రియాజెంట్ యాంటీ-ఇన్హిబిటరీ DNA పాలిమరేస్ మరియు UNG ఎంజైమ్‌ల మిశ్రమ ఎంజైమ్‌లతో qPCR కోసం యాజమాన్య బఫర్‌ను ఉపయోగిస్తుంది.అందువల్ల, ఇది ఇన్హిబిటర్‌లను కలిగి ఉన్న నమూనాలలో లక్ష్య జన్యువుల యొక్క మంచి విస్తరణను పొందవచ్చు మరియు PCR అవశేషాలు మరియు ఏరోసోల్ కాలుష్యం వల్ల కలిగే తప్పుడు సానుకూల విస్తరణను నిరోధించవచ్చు.అప్లైడ్ బయోసిస్టమ్స్, ఎపెన్‌డార్ఫ్, బయో-రాడ్, రోచె మొదలైన చాలా ఫ్లోరోసెంట్ క్వాంటిటేటివ్ PCR సాధనాలకు ఈ రియాజెంట్ అనుకూలంగా ఉంటుంది.

భాగాలు

1. 50×సెన్సిడైరెక్ట్ ఎంజైమ్/UNG మిక్స్

2. 2×సెన్సిడైరెక్ట్ ప్రీమిక్స్ బఫర్ (dUTP)

నిల్వ పరిస్థితులు

దీర్ఘకాల నిల్వ కోసం అన్ని భాగాలు -20℃ వద్ద మరియు 3 నెలల వరకు 4℃ వద్ద ఉంచాలి.దయచేసి ఉపయోగించే ముందు ద్రవీభవన మరియు సెంట్రిఫ్యూజ్ తర్వాత పూర్తిగా కలపండి.తరచుగా ఫ్రీజ్-కరిగించడం మానుకోండి.

సైక్లింగ్ ప్రోటోకాల్

పైప్టింగ్ సూచనలు

1. ప్రైమర్ యొక్క చివరి సాంద్రత సాధారణంగా 0.2μM.మెరుగైన ఫలితాల కోసం, ప్రైమర్ ఏకాగ్రతను 0.2-1μM పరిధిలో ఆప్టిమైజ్ చేయవచ్చు.

2. సాధారణంగా, ప్రోబ్ ఏకాగ్రతను 0.1-0.3μM పరిధిలో ఆప్టిమైజ్ చేయవచ్చు.ప్రోబ్ యొక్క సరైన ఏకాగ్రత రియల్ టైమ్ PCR యాంప్లిఫికేషన్ పరికరం, ప్రోబ్ రకం మరియు ఫ్లోరోసెంట్ లేబులింగ్ పదార్థం యొక్క రకానికి సంబంధించినది.దయచేసి ఇన్స్ట్రుమెంట్ మాన్యువల్ లేదా ప్రతి ఫ్లోరోసెంట్ ప్రోబ్ యొక్క నిర్దిష్ట అవసరాలను చూడండి.

3. వివిధ రకాలైన నమూనాలు విభిన్న రకాల మరియు ఇన్హిబిటర్ యొక్క కంటెంట్ మరియు లక్ష్య జన్యువు యొక్క కాపీ సంఖ్యను కలిగి ఉంటాయి.నమూనా వాల్యూమ్‌ను వాస్తవ స్థితి ద్వారా పరిగణించాలి.అవసరమైతే, న్యూక్లీజ్-ఫ్రీ వాటర్ లేదా TE బఫర్‌ని జోడించడం ద్వారా నమూనా యొక్క పలుచన చేయండి.

4. వివిధ నమూనాల సిఫార్సు వాల్యూమ్:

నాణ్యత నియంత్రణ

1. ఫంక్షన్ డిటెక్షన్: qPCR యొక్క సున్నితత్వం, నిర్దిష్టత మరియు పునరావృతం.

2. ఎక్సోజనస్ న్యూక్లీస్ యాక్టివిటీ లేదు: ఎక్సోజనస్ ఎండోన్యూకలీస్ మరియు ఎక్సోన్యూకలీస్ పొల్యూషన్ లేదు.

ఉత్పత్తి గమనికలు

1. ఈ ఉత్పత్తి హాట్-స్టార్ట్ DNA పాలిమరేస్ యొక్క నవల రకాన్ని ఉపయోగిస్తుంది, ఇది 1-5 నిమిషాలలో సక్రియం చేయబడుతుంది. దాని ప్రతిచర్య బఫర్ ఆప్టిమైజ్ చేయబడినందున, ప్రోబ్ పద్ధతిని ఉపయోగించి డబుల్ లేదా బహుళ ఫ్లోరోసెన్స్ క్వాంటిటేటివ్ PCR కోసం ఇది మరింత అనుకూలంగా ఉంటుంది.

2. PCR యాంప్లిఫికేషన్ యొక్క Rn విలువ చాలా తక్కువగా ఉంటే లేదా యాంప్లిఫికేషన్ స్పష్టంగా నిరోధించబడితే, నమూనా మొత్తాన్ని తగ్గించడం, ప్రతిచర్య వాల్యూమ్‌ను పెంచడం లేదా నమూనా యొక్క మునుపటి పలుచన ఫలితాలను మెరుగుపరచవచ్చు.

3. రక్తం, లాలాజలం, మూత్రం, గొంతు శుభ్రముపరచు మొదలైన వాటి సేకరణ క్లినికల్ ప్రమాణాల అవసరాలను అనుసరించాలి మరియు న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ క్షీణతను నివారించడానికి తాజా నమూనాను ఉపయోగించవచ్చు.

4. వేర్వేరు యాంప్లికాన్‌లు dUTPకి విభిన్న వినియోగ సామర్థ్యాన్ని మరియు UNGకి సున్నితత్వాన్ని కలిగి ఉంటాయి కాబట్టి, UNG సిస్టమ్‌ను ఉపయోగిస్తున్నప్పుడు గుర్తించే సున్నితత్వం తగ్గితే రియాజెంట్‌లను ఆప్టిమైజ్ చేయాలి.అవసరమైతే సాంకేతిక మద్దతు కోసం దయచేసి మమ్మల్ని సంప్రదించండి.

5. ఒక-దశ ప్రతిచర్యల మధ్య క్యారీఓవర్ PCR ఉత్పత్తుల విస్తరణను నివారించడానికి, విస్తరణ కోసం అంకితమైన ప్రయోగాత్మక ప్రాంతం మరియు పైపెట్ అవసరం.చేతి తొడుగులతో ఆపరేట్ చేయండి మరియు తరచుగా మార్చండి మరియు PCR యాంప్లిఫికేషన్ తర్వాత రియాక్షన్ ట్యూబ్‌ను తెరవవద్దు.