2×HiF టాక్ ప్లస్ మాస్టర్ మిక్స్
పిల్లి సంఖ్య: HCR2014B
HIF Taq ప్లస్ మాస్టర్ మిక్స్ (డై విత్) అనేది ప్లస్ HIF DNA పాలిమరేస్, dNTPలు మరియు ఆప్టిమైజ్ చేయబడిన బఫర్ను కలిగి ఉన్న 2×ప్రీమిక్స్డ్ సొల్యూషన్ని ఉపయోగించడానికి సిద్ధంగా ఉంది.గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద రెండు మోనోక్లోనల్ యాంటీబాడీలు పాలీమరేస్ కార్యాచరణను మరియు 3′→5′ఎక్సోన్యూకలీస్ యాక్టివిటీని సులభంగా మరియు అత్యంత నిర్దిష్టమైన హాట్ స్టార్ట్ PCR కోసం మాస్టర్ మిక్స్కు జోడించబడతాయి.ఎంజైమ్కు పొడవైన ఫ్రాగ్మెంట్ యాంప్లిఫికేషన్ కెపాసిటీని అందించడానికి మాస్టర్ మిక్స్కు ఎక్స్టెన్షన్ ఫ్యాక్టర్ జోడించబడింది, యాంప్లిఫికేషన్ పొడవు 13 kb వరకు ఉంటుంది, ఎంజైమ్ 5′→3′ DNA పాలిమరేస్ యాక్టివిటీని కలిగి ఉంటుంది మరియు 3′→5′ ఎక్సోన్యూకలీస్ చర్య, దాని విశ్వసనీయత టాక్ DNA పాలిమరేస్ కంటే 83 రెట్లు, ఇది సాధారణ DNA పాలిమరేస్ కంటే 9 రెట్లు.ఇది సంక్లిష్ట టెంప్లేట్ల విస్తరణకు అనుకూలంగా ఉంటుంది, యాంప్లిఫికేషన్ ఉత్పత్తి మొద్దుబారిన ముగింపు.
2×HIF టాక్ ప్లస్ మాస్టర్ మిక్స్ (డైతో) వేగవంతమైన మరియు సులభమైన, అధిక సున్నితత్వం, బలమైన నిర్దిష్టత, మంచి స్థిరత్వం మొదలైన ప్రయోజనాలను కలిగి ఉంది, ప్రతిచర్య వ్యవస్థకు ప్రైమర్లు మరియు టెంప్లేట్లను మాత్రమే జోడించాలి మరియు రెండు-తో విస్తరించవచ్చు. స్టెప్ ప్రోటోకాల్, ప్రయోగాత్మక దశలను సులభతరం చేయడం మరియు సమయాన్ని ఆదా చేయడం.ఈ ఉత్పత్తి ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ సూచిక రంగులను కలిగి ఉంటుంది మరియు PCR ఉత్పత్తులను నేరుగా ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ కోసం ఉపయోగించవచ్చు.అదనంగా, ఉత్పత్తి నిర్దిష్ట రక్షణ ఏజెంట్ను కూడా కలిగి ఉంటుంది, తద్వారా మాస్టర్ మిక్స్ పదేపదే ఫ్రీజ్-కరిగించిన తర్వాత స్థిరమైన కార్యాచరణను నిర్వహించగలదు.
నిల్వ పరిస్థితులు
ఉత్పత్తులు -25~-15℃ వద్ద 1 సంవత్సరం పాటు నిల్వ చేయాలి.
స్పెసిఫికేషన్లు
ఉత్పత్తి వివరణ | మాస్టర్ మిక్స్ |
ఏకాగ్రత | 2× |
హాట్ స్టార్ట్ | అంతర్నిర్మిత హాట్ స్టార్ట్ |
ఓవర్హాంగ్ | మొద్దుబారిన |
ప్రతిచర్య వేగం | వేగవంతమైన |
పరిమాణం (తుది ఉత్పత్తి) | 13kb వరకు |
రవాణా కోసం పరిస్థితులు | పొడి మంచు |
ఉత్పత్తి రకం | అధిక విశ్వసనీయ PCR ప్రీమిక్స్లు |
సూచనలు
1.PCR ప్రతిచర్య వ్యవస్థ
భాగాలు | వాల్యూమ్ (μL) |
DNA టెంప్లేట్ | తగినది |
ఫార్వర్డ్ ప్రైమర్ (10 μmol/L) | 2.5 |
రివర్స్ ప్రైమర్ (10 μmol/L) | 2.5 |
2×HIF టాక్ ప్లస్ మాస్టర్ మిక్స్ | 25 |
ddH2O | 50 వరకు |
2.విభిన్న టెంప్లేట్ల ఉపయోగం సిఫార్సు చేయబడింది
టెంప్లేట్ రకం | శకలాలు 1kb నుండి 10 kb వరకు విస్తరించండి |
జన్యుసంబంధమైన DNA | 50ng-200 ng |
ప్లాస్మిడ్ లేదా వైరల్ DNA | 10pg-20ng |
cDNA | 1-2.5 µL (చివరి PCR ప్రతిచర్య వాల్యూమ్లో 10% మించకూడదు) |
3.యాంప్లిఫికేషన్ ప్రోటోకాల్
1) రెండు-దశల ప్రోటోకాల్ (సంక్లిష్టత టెంప్లేట్)
సైకిల్ దశ | టెంప్ | సమయం | సైకిళ్లు |
ప్రారంభ డీనాటరేషన్ | 98℃ | 3 నిమి | 1 |
డీనాటరేషన్ | 98℃ | 10సె | 30-35 |
పొడిగింపు | 68℃ | 30 సెకను/kb | |
చివరి పొడిగింపు | 72℃ | 5 నిమి | 1 |
2) మూడు-దశల ప్రోటోకాల్ (సాధారణ ప్రోటోకాల్)
సైకిల్ దశ | టెంప్ | సమయం | సైకిళ్లు |
ప్రారంభ డీనాటరేషన్ | 98℃ | 3 నిమి | 1 |
డీనాటరేషన్ | 98℃ | 10సె | 30-35 |
ఎనియలింగ్ | 60℃ | 20 సె | |
పొడిగింపు | 72℃ | 30 సెకను/kb | |
చివరి పొడిగింపు | 72℃ | 5 నిమి | 1 |
3) ఎనియలింగ్ గ్రేడియంట్ ప్రోటోకాల్ (సంక్లిష్టత టెంప్లేట్)
సైకిల్ దశ | ఉష్ణోగ్రత | సమయం | సైకిళ్లు |
ప్రారంభ డీనాటరేషన్ | 98℃ | 3 నిమి | 1 |
డీనాటరేషన్ | 98℃ | 10 సె | 15 (ప్రతి చక్రానికి 1℃ తగ్గింపు) |
గ్రేడియంట్ ఎనియలింగ్ | 70-55℃ | 20 సె | |
పొడిగింపు | 72℃ | 30 సెకను/kb | |
డీనాటరేషన్ | 98℃ | 10 సె |
20 |
ఎనియలింగ్ | 55℃ | 20 సె | |
పొడిగింపు | 72℃ | 30 సెకను/kb | |
చివరి పొడిగింపు | 72℃ | 5 నిమి | 1 |
విభిన్న యాంప్లిఫికేషన్ ప్రోటోకాల్ కింద ఫీచర్లు
ప్రోటోకోl | రెండు-దశ | మూడు-దశ | గ్రేడియంట్ ఎనియలింగ్ |
స్పెసిఫికేషన్ | వేగంగా | మధ్యస్థ | నెమ్మదిగా |
విశిష్టత | అధిక | మధ్యస్థ | అధిక |
PCR దిగుబడి | మధ్యస్థ | అధిక | మధ్యస్థ |
గుర్తింపు రేటు | అధిక | మధ్యస్థ | అధిక |
గమనికలు
దయచేసి మీ ఆరోగ్యం మరియు భద్రతను నిర్ధారించడానికి అవసరమైన PPE, అటువంటి ల్యాబ్ కోటు మరియు చేతి తొడుగులు ధరించండి!