మల్టీప్లెక్స్ qPCR ప్రోబ్ ప్రీమిక్స్
పిల్లి సంఖ్య: HCB5051A
TaqMan మల్టీప్లెక్స్ qPCR మాస్టర్ మిక్స్ (డై బేస్డ్) అనేది 2 × రియల్-టైమ్ క్వాంటిటేటివ్ PCR యాంప్లిఫికేషన్‌కు ముందస్తు పరిష్కారం, ఇది అధిక సున్నితత్వం మరియు నిర్దిష్టతతో వర్గీకరించబడుతుంది, ఇది నీలం రంగులో ఉంటుంది మరియు నమూనా జోడింపు ప్రభావాన్ని కలిగి ఉంటుంది.ఈ ఉత్పత్తి 2× మిక్స్ ప్రీ-మిక్స్డ్ రియాజెంట్, ఇది ఒకే రియాక్షన్‌లో నాలుగు ఫ్లోరోసెంట్ క్వాంటిటేటివ్ PCR ప్రతిచర్యలను బాగా ఎనేబుల్ చేస్తుంది.ఈ ఉత్పత్తి హాట్-స్టార్ట్ టాక్ ఎంజైమ్‌కు జన్యుపరంగా మార్పు చెందిన యాంటీబాడీ పద్ధతిని కలిగి ఉంది, ఇది యాంప్లిఫికేషన్ సెన్సిటివిటీ మరియు నిర్దిష్టతను బాగా మెరుగుపరుస్తుంది.అదే సమయంలో, ఈ ఉత్పత్తి బహుళ-ప్రతిస్పందన బఫర్‌ను లోతుగా ఆప్టిమైజ్ చేసింది, ఇది ప్రతిచర్య యొక్క విస్తరణ సామర్థ్యాన్ని మెరుగుపరుస్తుంది మరియు తక్కువ-ఏకాగ్రత టెంప్లేట్‌ల ప్రభావవంతమైన విస్తరణను ప్రోత్సహిస్తుంది.ఈ ఉత్పత్తిని జన్యురూపం మరియు మల్టీప్లెక్స్ పరిమాణాత్మక విశ్లేషణ కోసం ఉపయోగించవచ్చు.
స్పెసిఫికేషన్
| హాట్ స్టార్ట్ | అంతర్నిర్మిత హాట్ ప్రారంభం |
| గుర్తింపు పద్ధతి | ప్రైమర్-ప్రోబ్ డిటెక్షన్ |
| PCR పద్ధతి | qPCR |
| పాలిమరేస్ | టాక్ DNA పాలిమరేస్ |
| నమూనా రకం | DNA |
నిల్వ పరిస్థితులు
ఉత్పత్తి పొడి మంచుతో రవాణా చేయబడుతుంది మరియు 2 సంవత్సరాల పాటు -25~-15℃ వద్ద నిల్వ చేయబడుతుంది.
సూచనలు
1. ప్రతిచర్యవ్యవస్థ
| భాగాలు | వాల్యూమ్ (μL) | చివరి ఏకాగ్రత |
| 2× TaqMan మల్టీప్లెక్స్ qPCR మాస్టర్ మిక్స్ | 12.5 | 1× |
| ప్రైమర్ మిక్స్ (10 μmol/L) a | × | 0.1 - 0.5 μmol/L |
| ప్రోబ్ మిక్స్ (10 μmol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| రోక్స్ రిఫరెన్స్ డై | 0.5 | 1× |
| DNA/cDNA మూస | 1-10 | - |
| ddH2O | 25 వరకు | - |
గమనికలు:తీవ్రమైన వణుకు నుండి అధిక బుడగలు నివారించడానికి ఉపయోగించే ముందు పూర్తిగా కలపండి.
a.ప్రైమర్ ఏకాగ్రత: ప్రైమర్ మిక్స్ అనేక జతల ప్రైమర్‌లను కలిగి ఉంటుంది, సాధారణంగా ప్రతి ప్రైమర్ తుది సాంద్రత 0.2 μmol/L వద్ద ఉంటుంది మరియు తగిన విధంగా 0.1 మరియు 0.5 μmol/L మధ్య కూడా సర్దుబాటు చేయబడుతుంది.
బి.ప్రోబ్ ఏకాగ్రత: ప్రోబ్ మిక్స్ వివిధ ఫ్లోరోసెన్స్ సిగ్నల్‌లతో బహుళ ప్రోబ్‌లను కలిగి ఉంటుంది మరియు ప్రతి ప్రోబ్ యొక్క ఏకాగ్రతను నిర్దిష్ట పరిస్థితికి అనుగుణంగా 50 మరియు 250 nmol/L మధ్య సర్దుబాటు చేయవచ్చు.
1.రోక్స్ డై సూచన: ఇది బావుల మధ్య ఉత్పన్నమయ్యే ఫ్లోరోసెన్స్ సిగ్నల్ యొక్క లోపాన్ని సరిచేయడానికి అప్లైడ్ బయోసిస్టమ్స్ వంటి రియల్ టైమ్ PCR యాంప్లిఫికేషన్ పరికరంలో ఉపయోగించబడుతుంది;ఈ ఉత్పత్తిలో Rox డై సూచన లేదు.అవసరమైతే Cas#10200 సిఫార్సు చేయబడింది.
2.టెంప్లేట్ పలుచన: qPCR అత్యంత సున్నితమైనది మరియు ఉపయోగం కోసం టెంప్లేట్‌ను పలుచన చేయాలని సిఫార్సు చేయబడింది.టెంప్లేట్ cDNA స్టాక్ సొల్యూషన్ అయితే, టెంప్లేట్ వాల్యూమ్ మొత్తం వాల్యూమ్‌లో 1/10కి మించకూడదు.
3.ప్రతిచర్య వ్యవస్థ: 25μL,30μL లేదా 50 μL లక్ష్య జన్యు విస్తరణ యొక్క ప్రభావం మరియు పునరావృతతను నిర్ధారించడానికి సిఫార్సు చేయబడింది.
4.సిస్టమ్ తయారీ: దయచేసి సూపర్ క్లీన్ బెంచ్‌లో సిద్ధం చేయండి మరియు న్యూక్లీజ్ అవశేషాలు లేకుండా చిట్కాలు మరియు రియాక్షన్ ట్యూబ్‌లను ఉపయోగించండి;ఫిల్టర్ కాట్రిడ్జ్‌లతో చిట్కాలను ఉపయోగించమని సిఫార్సు చేయబడింది.క్రాస్ కాలుష్యం మరియు ఏరోసోల్ కాలుష్యాన్ని నివారించండి.
2.ప్రతిచర్య కార్యక్రమం
| సైకిల్ దశ | టెంప్. | సమయం | సైకిళ్లు |
| ప్రారంభ-డినాటరేషన్ | 95 ℃ | 5 నిమిషాలు | 1 |
| డీనాటరేషన్ | 95 ℃ | 15సె | 45 |
| అన్నేలింగ్/ఎక్స్‌టెన్షన్ | 60 ℃ | 30సె |
గమనికలు:
1.ఎనియలింగ్/ఎక్స్‌టెన్షన్: డిజైన్ చేయబడిన ప్రైమర్ Tm విలువ ప్రకారం ఉష్ణోగ్రత మరియు సమయాన్ని తగిన విధంగా సర్దుబాటు చేయవచ్చు.
2.ఫ్లోరోసెన్స్ సిగ్నల్ అక్విజిషన్: వివిధ qPCR డిటెక్షన్ సాధనాలకు అవసరమైన ఫ్లోరోసెన్స్ సిగ్నల్ అక్విజిషన్ సమయం భిన్నంగా ఉంటుంది, దయచేసి కనీస సమయ పరిమితి ప్రకారం సెట్ చేయండి.అనేక సాధారణ సాధనాల సమయం క్రింది విధంగా సెట్ చేయబడింది:
20 సెకన్లు: అప్లైడ్ బయోసిస్టమ్స్ 7700, 7900HT, 7500 ఫాస్ట్
31 సెకను: అప్లైడ్ బయోసిస్టమ్స్ 7300
32 సెకన్లు: అప్లైడ్ బయోసిస్టమ్స్ 7500
గమనికలు
దయచేసి మీ ఆరోగ్యం మరియు భద్రతను నిర్ధారించడానికి అవసరమైన PPE, అటువంటి ల్యాబ్ కోటు మరియు చేతి తొడుగులు ధరించండి!
