5×నియోస్క్రిప్ట్ ఫాస్ట్ RT-qPCR ప్రీమిక్స్ ప్లస్-UNG

పిల్లి సంఖ్య: HCB5142A

నియోస్క్రిప్ట్ ఫాస్ట్ RT ప్రీమిక్స్-UNG (ప్రోబ్ qRT-PCR) అనేది వన్-స్టెప్ రివర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్షన్ మరియు క్వాంటిటేటివ్ PCR (qRT-PCR) కోసం అనువైన అత్యంత స్థిరమైన వన్-ట్యూబ్ ప్రోబ్-ఆధారిత మిశ్రమం.ఇది ప్రైమర్‌లు మరియు ప్రోబ్‌ల ప్రీ-మిక్సింగ్‌కు మద్దతు ఇస్తుంది మరియు తక్కువ ఉష్ణోగ్రత వద్ద ఎక్కువ కాలం నిల్వ చేసిన తర్వాత స్థిరంగా ఉంటుంది.అదనపు ట్యూబ్ ఓపెనింగ్/పైప్‌టింగ్ ఆపరేషన్ లేకుండా ఉపయోగించినప్పుడు పరీక్షించాల్సిన నమూనా నేరుగా జోడించబడుతుంది.ఈ ఉత్పత్తి భాగాలను అందిస్తుంది, ఉదా హాట్-స్టార్ట్ DNA పాలిమరేస్, M-MLV, హీట్-లేబుల్ యురాసిల్ DNA గ్లైకోసైలేస్ (TS-UNG), RNase ఇన్హిబిటర్, MgCl₂, dNTPలు (dTTPకి బదులుగా dUTPతో), మరియు స్టెబిలైజర్లు.జన్యుపరంగా మార్పు చెందిన వేగవంతమైన యాంప్లిఫికేషన్ రివర్స్ ట్రాన్స్‌క్రిప్టేజ్ మరియు DNA పాలిమరేస్‌తో, PCR యాంప్లిఫికేషన్‌ను 20-40 నిమిషాల్లో పూర్తి చేయడం సాధ్యపడుతుంది.ఈ రియాజెంట్ qPCR కోసం యాంటీ ఇన్హిబిటరీ యాంప్లిఫికేషన్ ఎంజైమ్ మరియు UNG ఎంజైమ్ మిశ్రమ ఎంజైమ్‌లతో ప్రత్యేక బఫర్‌ను ఉపయోగిస్తుంది.అందువల్ల, ఇది లక్ష్య జన్యువుల యొక్క మంచి విస్తరణను పొందవచ్చు మరియు PCR అవశేషాలు మరియు ఏరోసోల్ కాలుష్యం వల్ల కలిగే తప్పుడు విస్తరణను నిరోధించవచ్చు.అప్లైడ్ బయోసిస్టమ్స్, ఎపెన్‌డార్ఫ్, బయో-రాడ్ మరియు రోచె వంటి తయారీదారుల నుండి చాలా ఫ్లోరోసెన్స్ క్వాంటిటేటివ్ PCR సాధనాలకు ఈ రియాజెంట్ అనుకూలంగా ఉంటుంది.

భాగం

1.25×నియోస్క్రిప్ట్ ఫాస్ట్ RTase/UNG మిక్స్

2.5×నియోస్క్రిప్ట్ ఫాస్ట్ RT ప్రీమిక్స్ బఫర్ (dUTP)

నిల్వ పరిస్థితులు

దీర్ఘకాల నిల్వ కోసం అన్ని భాగాలు -20℃ వద్ద మరియు 3 నెలల వరకు 4℃ వద్ద ఉంచాలి.దయచేసి ఉపయోగించే ముందు ద్రవీభవన మరియు సెంట్రిఫ్యూజ్ తర్వాత పూర్తిగా కలపండి.తరచుగా ఫ్రీజ్-కరిగించడం మానుకోండి.

qRT-PCR రియాక్షన్ సిస్టమ్ తయారీ

1) a. ప్రైమర్ యొక్క చివరి సాంద్రత సాధారణంగా 0.2μM.మెరుగైన ఫలితాల కోసం, ప్రైమర్ ఏకాగ్రతను 0.2-1μM పరిధిలో ఆప్టిమైజ్ చేయవచ్చు.సాధారణంగా, ప్రోబ్ ఏకాగ్రతను 0.1-0.3μM పరిధిలో ఆప్టిమైజ్ చేయవచ్చు.

2) b. వేగవంతమైన PCR విధానాన్ని ఉపయోగిస్తున్నప్పుడు, ప్రైమర్‌లు మరియు ప్రోబ్‌ల ఏకాగ్రతను పెంచడం వలన మెరుగైన యాంప్లిఫికేషన్ ఫలితాలు రావచ్చు మరియు వాటి నిష్పత్తిని తదనుగుణంగా ఆప్టిమైజ్ చేయాలి.

3) వివిధ రకాలైన నమూనాలు వివిధ రకాలు మరియు ఇన్హిబిటర్ యొక్క కంటెంట్ మరియు లక్ష్య జన్యువు యొక్క కాపీ సంఖ్యను కలిగి ఉంటాయి.నమూనా వాల్యూమ్‌ను వాస్తవ స్థితి ద్వారా పరిగణించాలి.అవసరమైతే, నమూనాను న్యూక్లీజ్ లేని నీరు లేదా TE బఫర్‌తో పలుచన చేయండి.

ప్రతిచర్య సిషరతులు

నాణ్యత నియంత్రణ

1.ఫంక్షన్ గుర్తింపు: qPCR యొక్క సున్నితత్వం, నిర్దిష్టత మరియు పునరావృతత.

2.ఎక్సోజనస్ న్యూక్లీస్ యాక్టివిటీ లేదు: ఎక్సోజనస్ ఎండోన్యూక్లీస్ మరియు ఎక్సోన్యూకలీస్ పొల్యూషన్ లేదు.

గమనికలు

1.వేగవంతమైన DNA పాలిమరేస్ యొక్క యాంప్లిఫికేషన్ రేటు 1kb/10s కంటే తక్కువ కాదు.వేర్వేరు PCR సాధనాలు వేర్వేరు తాపన మరియు శీతలీకరణ వేగం, ఉష్ణోగ్రత నియంత్రణ మోడ్‌లు మరియు ఉష్ణ వాహకతను కలిగి ఉంటాయి, తద్వారా మీ ప్రైమర్/ప్రోబ్ ఏకాగ్రత మరియు మీ నిర్దిష్ట వేగవంతమైన PCR పరికరంతో కలిపి రన్నింగ్ పద్ధతిని ఆప్టిమైజ్ చేయడం చాలా అవసరం.

2.ఈ ఉత్పత్తి విస్తృత అనువర్తనాన్ని ప్రదర్శిస్తుంది మరియు ఇది అధిక-సున్నితత్వ పరమాణు నిర్ధారణకు అనుకూలంగా ఉంటుంది.మూడు-దశల PCR పద్ధతి తక్కువ ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత ఉన్న ప్రైమర్‌ల కోసం లేదా 200 bp కంటే ఎక్కువ పొడవైన శకలాలు విస్తరించడం కోసం సిఫార్సు చేయబడింది.

3.వేర్వేరు యాంప్లికాన్‌లు dUTP యొక్క విభిన్న వినియోగ సామర్థ్యాన్ని మరియు UNGకి విభిన్న సున్నితత్వాన్ని కలిగి ఉంటాయి కాబట్టి, UNG సిస్టమ్‌ను ఉపయోగిస్తున్నప్పుడు గుర్తించే సున్నితత్వం తగ్గితే రియాజెంట్‌లను ఆప్టిమైజ్ చేయాలి.అవసరమైతే సాంకేతిక మద్దతు కోసం దయచేసి మమ్మల్ని సంప్రదించండి.

4.క్యారీఓవర్ PCR ఉత్పత్తుల విస్తరణను నివారించడానికి, విస్తరణ కోసం ప్రత్యేక ప్రయోగాత్మక ప్రాంతం మరియు పైపెట్ అవసరం.చేతి తొడుగులతో ఆపరేట్ చేయండి మరియు తరచుగా మార్చండి మరియు యాంప్లిఫికేషన్ తర్వాత PCR ట్యూబ్‌ను తెరవవద్దు.