2×PCR మాస్టర్ మిక్స్ (డై లేకుండా)
PCR మాస్టర్ మిక్స్ అనేది Taq DNA పాలిమరేస్, dNTP మిక్స్ MgCl2 మరియు ఆప్టిమైజ్ చేయబడిన బఫర్తో సహా ఉపయోగించడానికి సిద్ధంగా ఉన్న ఒక రకమైన సంప్రదాయ PCR ప్రీమిక్స్డ్ సొల్యూషన్.ప్రతిచర్య సమయంలో, యాంప్లిఫికేషన్ కోసం ప్రైమర్ మరియు టెంప్లేట్ మాత్రమే జోడించబడతాయి, ఇది ప్రయోగం యొక్క ఆపరేషన్ దశలను చాలా సులభతరం చేస్తుంది.ఈ ఉత్పత్తి అద్భుతమైన స్టెబిలైజర్లను కలిగి ఉంది మరియు 4℃ వద్ద 3 నెలల పాటు నిల్వ చేయవచ్చు.PCR ఉత్పత్తి 3′-dA ప్రోట్రూషన్ను కలిగి ఉంటుంది మరియు T వెక్టర్లోకి సులభంగా క్లోన్ చేయబడుతుంది.
నిల్వ పరిస్థితులు
ఉత్పత్తిని రెండు సంవత్సరాల పాటు -25℃~ -15℃ వద్ద నిల్వ చేయాలి.
స్పెసిఫికేషన్లు
ఫిడిలిటీ (వర్సెస్ టాక్) | 1× |
హాట్ స్టార్ట్ | No |
ఓవర్హాంగ్ | 3′-A |
పాలిమరేస్ | టాక్ DNA పాలిమరేస్ |
ప్రతిచర్య ఫార్మాట్ | సూపర్మిక్స్ లేదా మాస్టర్ మిక్స్ |
ప్రతిచర్య వేగం | ప్రామాణికం |
ఉత్పత్తి రకం | PCR మాస్టర్ మిక్స్ (2×) |
సూచనలు
1.ప్రతిచర్య వ్యవస్థ
భాగాలు | పరిమాణం (μL) |
టెంప్లేట్ DNA | తగినది |
ప్రైమర్ 1 (10 μmol/L) | 2 |
ప్రైమర్ 2 (10 μmol/L) | 2 |
PCR మాస్టర్ మిక్స్ | 25 |
ddH2O | 50 వరకు |
2.యాంప్లిఫికేషన్ ప్రోటోకాల్
సైకిల్ దశలు | ఉష్ణోగ్రత (°C) | సమయం | సైకిళ్లు |
ప్రీ-డినాటరేషన్ | 94 ℃ | 5 నిమిషాలు | 1 |
డీనాటరేషన్ | 94 ℃ | 30 సె | 35 |
ఎనియలింగ్ | 50-60 ℃ | 30 సె | |
పొడిగింపు | 72 ℃ | 30-60సెకన్/కెబి | |
చివరి పొడిగింపు | 72 ℃ | 10 నిమిషాలు | 1 |
గమనికలు:
1) మూస వినియోగం: 50-200 ng జన్యుసంబంధమైన DNA;0.1- 10 ng ప్లాస్మిడ్ DNA.
2) Mg2+ఏకాగ్రత: ఈ ఉత్పత్తి చాలా PCR ప్రతిచర్యలకు అనువైన 3 mM MgCl2ని కలిగి ఉంది.
3) ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత: దయచేసి ప్రైమర్ల యొక్క సైద్ధాంతిక Tm విలువను చూడండి.ఎనియలింగ్ ఉష్ణోగ్రత ప్రైమర్ యొక్క సైద్ధాంతిక విలువ కంటే 2-5 ℃ తక్కువగా సెట్ చేయబడుతుంది.
4) పొడిగింపు సమయం: పరమాణు గుర్తింపు కోసం, 30 సెకన్లు/kb సిఫార్సు చేయబడింది.జన్యు క్లోనింగ్ కోసం, 60sec/kb సిఫార్సు చేయబడింది.
గమనికలు
1.మీ భద్రత మరియు ఆరోగ్యం కోసం, దయచేసి ఆపరేషన్ కోసం ల్యాబ్ కోట్లు మరియు డిస్పోజబుల్ గ్లోవ్స్ ధరించండి.
2.పరిశోధన ఉపయోగం కోసం మాత్రమే!