వైరల్ DNA/RNA వెలికితీత కిట్
నాసోఫారింజియల్ స్వాబ్లు, ఎన్విరాన్మెంటల్ స్వాబ్లు, సెల్ కల్చర్ సూపర్నాటెంట్లు మరియు టిష్యూ హోమోజెనేట్ సూపర్నాటెంట్ల వంటి నమూనాల నుండి అధిక స్వచ్ఛత వైరల్ DNA/RNA యొక్క వేగవంతమైన వెలికితీత కోసం ఈ కిట్ అనుకూలంగా ఉంటుంది.ఈ కిట్ సిలికా మెమ్బ్రేన్ ప్యూరిఫికేషన్ టెక్నాలజీపై ఆధారపడి ఉంటుంది, ఇది ఫినాల్/క్లోరోఫామ్ ఆర్గానిక్ ద్రావకాలు లేదా అధిక నాణ్యత కలిగిన వైరల్ DNA/RNAను సంగ్రహించడానికి ఎక్కువ సమయం తీసుకునే ఆల్కహాల్ అవక్షేపణను ఉపయోగించాల్సిన అవసరాన్ని తొలగిస్తుంది.పొందిన న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలు మలినాలు లేకుండా ఉంటాయి మరియు రివర్స్ ట్రాన్స్క్రిప్షన్, PCR, RT-PCR, రియల్-టైమ్ PCR, నెక్స్ట్-జనరేషన్ సీక్వెన్సింగ్ (NGS) మరియు నార్తర్న్ బ్లాట్ వంటి దిగువ ప్రయోగాలలో ఉపయోగించడానికి సిద్ధంగా ఉంటాయి.
నిల్వ పరిస్థితులు
15 ~ 25℃ వద్ద నిల్వ చేయండి మరియు గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద రవాణా చేయండి
భాగాలు
భాగాలు | 100RXNS |
బఫర్ VL | 50 మి.లీ |
బఫర్ RW | 120 మి.లీ |
RNase-రహిత ddH2 O | 6 మి.లీ |
FastPure RNA నిలువు వరుసలు | 100 |
సేకరణ గొట్టాలు (2ml) | 100 |
RNase-రహిత సేకరణ గొట్టాలు (1 .5ml) | 100 |
బఫర్ VL:లైసిస్ మరియు బైండింగ్ కోసం వాతావరణాన్ని అందించండి.
బఫర్ RW:అవశేష ప్రోటీన్లు మరియు ఇతర మలినాలను తొలగించండి.
RNase-రహిత ddH2O:స్పిన్ కాలమ్లోని పొర నుండి ఎలుట్ DNA/RNA.
FastPure RNA నిలువు వరుసలు:ప్రత్యేకంగా DNA/RNAని శోషించండి.
సేకరణ గొట్టాలు 2 ml:ఫిల్ట్రేట్ సేకరించండి.
RNase-రహిత కలెక్షన్ ట్యూబ్లు 1.5 ml:DNA/RNA సేకరించండి.
అప్లికేషన్లు
నాసోఫారింజియల్ స్వాబ్స్, ఎన్విరాన్మెంటల్ స్వాబ్స్, సెల్ కల్చర్ సూపర్నాటెంట్లు మరియు టిష్యూ హోమోజెనేట్ సూపర్నాటెంట్లు.
స్వీయ-సిద్ధమైన పదార్థంials
RNase-రహిత పైపెట్ చిట్కాలు, 1.5 ml RNase-రహిత సెంట్రిఫ్యూజ్ ట్యూబ్లు, సెంట్రిఫ్యూజ్, వోర్టెక్స్ మిక్సర్ మరియు పైపెట్లు.
ప్రయోగ ప్రక్రియ
బయో సేఫ్టీ క్యాబినెట్లో కింది దశలన్నింటినీ అమలు చేయండి.
1. RNase-రహిత సెంట్రిఫ్యూజ్ ట్యూబ్కు 200 μl నమూనాను జోడించండి (తగినంత నమూనా లేనప్పుడు PBS లేదా 0.9% NaClతో తయారు చేయండి), 500 μl బఫర్ VLని జోడించండి, 15 - 30 సెకన్ల పాటు సుడిగుండం ద్వారా బాగా కలపండి మరియు సెంట్రిఫ్యూజ్ ట్యూబ్ దిగువన మిశ్రమాన్ని సేకరించడానికి క్లుప్తంగా.
2. ఫాస్ట్ప్యూర్ ఆర్ఎన్ఏ నిలువు వరుసలను ఒక కలెక్షన్ ట్యూబ్లలో 2 మి.లీ.మిశ్రమాన్ని దశ 1 నుండి FastPure RNA నిలువు వరుసలకు బదిలీ చేయండి, 1 నిమిషానికి 12,000 rpm (13,400 × g) వద్ద సెంట్రిఫ్యూజ్ చేసి, ఫిల్ట్రేట్ను విస్మరించండి.
3. FastPure RNA నిలువు వరుసలకు 600 μl బఫర్ RWని జోడించండి, 30 సెకన్లకు 12,000 rpm (13,400 × g) వద్ద సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయండి మరియు ఫిల్ట్రేట్ను విస్మరించండి.
4. దశ 3ని పునరావృతం చేయండి.
5. 2 నిమిషాల పాటు ఖాళీ కాలమ్ను 12,000 rpm (13,400 × g) వద్ద సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయండి.
6. ఫాస్ట్ప్యూర్ ఆర్ఎన్ఏ నిలువు వరుసలను కొత్త RNase-రహిత కలెక్షన్ ట్యూబ్లలోకి 1.5 ml (కిట్లో అందించబడింది) జాగ్రత్తగా బదిలీ చేయండి మరియు కాలమ్ను తాకకుండా పొర మధ్యలో 30 - 50 μl RNase-రహిత ddH2O జోడించండి.గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద 1 నిమి మరియు సెంట్రిఫ్యూజ్ని 1 నిమి 12,000 rpm (13,400 × g) వద్ద నిలబడటానికి అనుమతించండి.
7. FastPure RNA నిలువు వరుసలను విస్మరించండి.DNA/RNA నేరుగా తదుపరి పరీక్షల కోసం ఉపయోగించబడుతుంది లేదా స్వల్ప కాలానికి -30~ -15°C లేదా ఎక్కువ కాలం -85 ~-65°C వద్ద నిల్వ చేయబడుతుంది.
గమనికలు
పరిశోధన ఉపయోగం కోసం మాత్రమే.రోగనిర్ధారణ ప్రక్రియలలో ఉపయోగం కోసం కాదు.
1. ముందుగానే గది ఉష్ణోగ్రతకు నమూనాలను సమం చేయండి.
2. వైరస్లు అత్యంత అంటువ్యాధి.దయచేసి ప్రయోగానికి ముందు అవసరమైన అన్ని భద్రతా జాగ్రత్తలు తీసుకున్నట్లు నిర్ధారించుకోండి.
3. నమూనా పదేపదే గడ్డకట్టడం మరియు కరిగించడాన్ని నివారించండి, ఎందుకంటే ఇది సంగ్రహించిన వైరల్ DNA/RNA యొక్క క్షీణతకు లేదా తగ్గిన దిగుబడికి దారితీయవచ్చు.
4. స్వీయ-సిద్ధమైన పరికరాలు RNase-రహిత పైపెట్ చిట్కాలు, 1.5 ml RNase-రహిత సెంట్రిఫ్యూజ్ ట్యూబ్లు, సెంట్రిఫ్యూజ్, వోర్టెక్స్ మిక్సర్ మరియు పైపెట్లను కలిగి ఉంటాయి.
5. కిట్ని ఉపయోగిస్తున్నప్పుడు, ల్యాబ్ కోట్, డిస్పోజబుల్ లేటెక్స్ గ్లోవ్స్ మరియు డిస్పోజబుల్ మాస్క్ ధరించండి మరియు RNase కాలుష్య ప్రమాదాన్ని తగ్గించడానికి RNase-రహిత వినియోగ వస్తువులను ఉపయోగించండి.
6. పేర్కొనకపోతే గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద అన్ని దశలను నిర్వహించండి.
మెకానిజం & వర్క్ఫ్లో