ఫాస్ఫేటేస్ ఆల్కలీన్ (ALP)
వివరణ
ఆల్కలీన్ ఫాస్ఫేటేస్ TAB5 జన్యువును కలిగి ఉండే రీకాంబినెంట్ E. కోలి జాతి నుండి తీసుకోబడింది.ఎంజైమ్ DNA మరియు RNA ఫాస్ఫోమోనోస్టర్ల 5´ మరియు 3´ చివరల డీఫోస్ఫోరైలేషన్ను ఉత్ప్రేరకపరుస్తుంది.అలాగే, ఇది రైబోస్, అలాగే డియోక్సిరిబోన్యూక్లియోసైడ్ ట్రైఫాస్ఫేట్లను (NTPలు మరియు dNTPలు) జలవిశ్లేషణ చేస్తుంది.TAB5 ఆల్కలీన్ ఫాస్ఫేటేస్ 5´ పొడుచుకు వచ్చిన, 5´ రీసెస్డ్ మరియు మొద్దుబారిన చివరలపై పనిచేస్తుంది.DNA లేదా RNA యొక్క ఫాస్ఫోరైలేటెడ్ చివరలను తొలగించడానికి క్లోనింగ్ లేదా ప్రోబ్ ఎండ్ లేబులింగ్ వంటి అనేక మాలిక్యులర్ బయాలజీ అప్లికేషన్లలో ఫాస్ఫేటేస్ను ఉపయోగించవచ్చు.క్లోనింగ్ ప్రయోగాలలో, డీఫోస్ఫోరైలేషన్ స్వీయ-బంధనం నుండి సరళీకృత ప్లాస్మిడ్ DNA ని నిరోధిస్తుంది.DNA సీక్వెన్సింగ్ కోసం ఒక టెంప్లేట్ను సిద్ధం చేయడానికి PCR ప్రతిచర్యలలో ఇది ఇన్కార్పొరేటెడ్ dNTPలను క్షీణింపజేస్తుంది.70°C వద్ద 5 నిమిషాల పాటు వేడి చేయడం ద్వారా ఎంజైమ్ పూర్తిగా మరియు తిరిగి పొందలేని విధంగా క్రియారహితం చేయబడుతుంది, తద్వారా లిగేషన్ లేదా ముగింపు లేబులింగ్కు ముందు ఫాస్ఫేటేస్ను తొలగించడం అనవసరం.
వాడుక
1.ఆల్కలీన్ ఫాస్ఫేటేస్ మాంసకృత్తులకు (యాంటీబాడీస్, స్ట్రెప్టావిడిన్ మొదలైనవి) ప్రత్యేకంగా లక్ష్య అణువులను గుర్తించగలదు మరియు ELISA, WB మరియు హిస్టోకెమికల్ డిటెక్షన్లో ఉపయోగించవచ్చు;
2. సెల్ఫ్-లింకింగ్ను నిరోధించడానికి DNA లేదా RNA యొక్క 5 '-టెర్మినల్ను డీఫాస్ఫోరైజ్ చేయడానికి ఆల్కలీన్ ఫాస్ఫేటేస్ను ఉపయోగించవచ్చు;
3.పైన డీఫాస్ఫోరైలేటెడ్ DNA లేదా RNA రేడియో-లేబుల్ చేయబడిన ఫాస్ఫేట్ల ద్వారా లేబుల్ చేయబడవచ్చు (T4 పాలీ-న్యూక్లియోటైడ్ కినేస్ ద్వారా)
రసాయన నిర్మాణం
స్పెసిఫికేషన్
పరీక్ష అంశాలు | స్పెసిఫికేషన్లు |
ఎంజైమ్ కార్యాచరణ | 5U/μL |
ఎండోన్యూక్లీస్ యాక్టివిటీ | కనిపెట్టబడలేదు |
Exonuuclease కార్యాచరణ | కనిపెట్టబడలేదు |
నిక్కింగ్ యాక్టివిటీ | కనిపెట్టబడలేదు |
RNase కార్యాచరణ | కనిపెట్టబడలేదు |
E.coli DNA | ≤1కాపీ/5U |
ఎండోటాక్సిన్ | LAL-పరీక్ష, ≤10EU/mg |
స్వచ్ఛత | ≥95% |
రవాణా మరియు నిల్వ
రవాణా:పరిసర
నిల్వ:2-8 ° C వద్ద నిల్వ చేయండి
సిఫార్సు చేసిన పునఃపరీక్షజీవితం:2 సంవత్సరం